大鼠血睪屏障在HBV DNA轉(zhuǎn)染中的保護作用及其影響因素.pdf

1、目的：與背景乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus，HBV）垂直傳播是指HBV以生殖細胞作為載體，把HBV DNA帶入胚胎，使子代成為HBV攜帶者或發(fā)病的一種新的、尚待證明的傳播方式。HBV父嬰傳播研究的關(guān)鍵點在于闡明HBV通過血睪屏障轉(zhuǎn)染精子的途徑。本課題通過活體轉(zhuǎn)染不同組的大鼠睪丸，旨在探討血睪屏障能否有效阻止含HBV DNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染曲細精管生精上皮細胞及影響血睪屏障完整性的因素。 方法：取20只Wistar成熟雄

2、性大鼠隨機分為實驗組(A組)和對照組（B組），A組于后肢肌注注射氫化可的松，B組注射生理鹽水，持續(xù)31天，向睪丸轉(zhuǎn)染含HBV DNA的質(zhì)粒，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)、實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR，real-time PCR)、原位雜交(in situ hybridization，ISH)和透射電子顯微鏡(transmission elect

3、ron microscopy，TEM)檢測睪丸組織HBV DNA的轉(zhuǎn)染情況。 結(jié)果：①A組樣本的睪丸組織經(jīng)PCR檢測發(fā)現(xiàn)組織中存在有HBV DNA；②通過real-time PCR的檢測發(fā)現(xiàn)A組HBV DNA平均含量高于B組，差異有統(tǒng)計學意義；③在A組樣本的睪丸組織中，HBV DNA分布彌散，可廣泛發(fā)現(xiàn)于生精上皮基底室和近腔室的生精細胞上；④在電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)A組生精小管基膜基膜厚薄不均，基膜組織疏松增厚，成波浪式皺褶，可見

4、基膜斷裂，精原細胞與支持細胞及生精小管的基膜之間出現(xiàn)較多空泡。 結(jié)論：①正常大鼠生精小管基膜完整、平滑、致密、厚薄均勻，氫化可的松可引起大鼠睪丸生精小管的基膜、緊密連接、支持細胞等超微結(jié)構(gòu)異常；②血睪屏障的破壞會會增加睪丸組織感染HBV DNA的風險；③生精小管的結(jié)構(gòu)異常及血睪屏障的損傷會導致大鼠睪丸的整個生精上皮易受到HBV DNA的轉(zhuǎn)染，造成轉(zhuǎn)染率的升高。 血睪屏障的完整性是血睪屏障起保護功能的重要基礎(chǔ)，破壞其完整性