大鼠撞擊傷后血—脊髓屏障的研究.pdf

1、脊髓損傷（spinalcordinjury,SCI）常導(dǎo)致悲慘后果，造成社會(huì)、家庭的巨大痛苦和沉重負(fù)擔(dān)，但對其病理變化機(jī)制和修復(fù)過程的研究卻是長期困擾臨床的難題，同時(shí)也成為了學(xué)者關(guān)心的熱點(diǎn)。脊髓受到外源性機(jī)械力破壞后，不僅破壞脊髓的實(shí)質(zhì)，包括損傷區(qū)的細(xì)胞以及軸突，同時(shí)破壞了血管結(jié)構(gòu)，損傷內(nèi)皮細(xì)胞，破壞血脊髓屏障（blood-spinalcordbarrier,BSCB）。這造成脊髓組織的水腫、缺血缺氧、并且血漿內(nèi)的各種分子無選擇性的進(jìn)入

2、脊髓實(shí)質(zhì)內(nèi)部，產(chǎn)生一系列繼發(fā)性損傷作用，加重脊髓的損傷。繼發(fā)性損傷的過程不僅造成，而且脊髓內(nèi)BSCB破壞范圍也隨之?dāng)U大，進(jìn)一步所以對于SCI后BSCB通透性變化顯得十分重要。
　　血-腦（脊髓）屏障損傷范圍的觀察方法多為注射外源性示蹤劑，我們曾在實(shí)驗(yàn)中采用血漿內(nèi)源性免疫球蛋白G（IgG）作為示蹤劑，觀察高血壓模型BSCB開放情況，取得很好的效果。本研究分為兩部分：第一部分用外源性IgG為示蹤劑，觀察脊髓損傷后不同時(shí)間點(diǎn)BSCB破壞

3、范圍，顯示BSCB在脊髓損傷后的變化規(guī)律。第二部分利在脊髓損傷后不同時(shí)間點(diǎn)靜脈內(nèi)注射分子量、生化性質(zhì)與大鼠IgG相近的外源性兔IgG為示蹤劑并與內(nèi)源性IgG分布范圍進(jìn)行比較。
　　第一部分，在大鼠脊髓撞擊傷模型中以靜脈注射的兔IgG為外源性示蹤劑，用免疫熒光顯示其在脊髓內(nèi)的分布，用圖像閾值分割技術(shù)處理圖像后，借此顯示BSCB通透性的變化，分析了損傷后不同時(shí)間點(diǎn)（0h、1d、3d、5d、7d）BSCB開放的范圍，長度（mm）分別為：

4、5.84±0.60、8.33±0.47、9.50±0.44、4.48±0.23、0.00±0.00；面積（mm2）本別為：6.24±1.00、5.73±0.37、7.17±0.15、0.75±0.06、0.00±0.00，清晰的顯示了SCI后BSCB開放的范圍。實(shí)驗(yàn)說明，BSCB在脊髓撞擊損傷后，早期會(huì)受到多種有害因素影響而發(fā)生繼發(fā)性損傷，損傷后3d時(shí)BSCB損傷范圍達(dá)到最大，隨后隨著各種有害因素的清除以及恢復(fù)能力的加強(qiáng)，BSCB損傷范

5、圍逐漸縮小，7d時(shí)外源性IgG已經(jīng)無法通過損傷區(qū)內(nèi)的微血管系統(tǒng)，說明BSCB已經(jīng)得以完全恢復(fù)。
　　第二部分，我們利用免疫雙標(biāo)的方法顯示大鼠內(nèi)源性IgG與注射入血的外源性兔IgG在脊髓內(nèi)的分布，觀察內(nèi)源性IgG能否示現(xiàn)BSCB破壞范圍。比較發(fā)現(xiàn)，兩者在SCI后分布的時(shí)程與分布范圍上有明顯的不同。時(shí)程上外源性兔IgG在脊髓內(nèi)7d時(shí)即不存在，而大鼠內(nèi)源性IgG直到14d才被清除；分布上在損傷早期（3d內(nèi)）內(nèi)源性大鼠自身IgG在損傷中央