正常及糖尿病大鼠血-視神經屏障研究.pdf

1、隨著糖尿病發(fā)病率的增加和患者壽命的延長，糖尿病視神經病變漸受重視。有關該病的發(fā)病機理目前尚不十分清楚且研究較少。近來，糖尿病與血-腦屏障的關系受到關注。由于視神經在解剖和組織學上的特殊性，本研究把血-視神經屏障特性的研究作為切入點，觀察血-視神經屏障結構和功能特征及其在糖尿病時的變化，探索其與糖尿病視神經病變的關系，旨在豐富對血-視神經屏障特性的認識及糖尿病視神經病變發(fā)病機理的研究，為其防治和進一步研究提供理論依據和實驗資料。該研究是我

2、國進入老齡化社會后亟待研究的重要課題。本研究共分兩部分：首先對血-視神經屏障特性進行研究；在此基礎上，觀察糖尿病時血-視神經屏障特性的變化。 第一部分正常大鼠血-視神經屏障特性比較研究 本研究分別取20只正常雄性SD大鼠視神經(篩板前區(qū)、篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段)、大腦皮層、坐骨神經。采用電鏡觀察其微血管內皮細胞的超微結構的特點；利用免疫組織化學和酶細胞化學的方法檢測血-腦屏障標記物(GLUT-1、0X-

3、26、0X-47、EBA、ALP、γ-GGT)的表達和內源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen外滲，旨在探討血-視神經屏障特性結構和功能的特點。結果如下：視神經各段、大腦皮層和坐骨神經部位微血管內皮細胞均為緊密連接，但篩板前區(qū)質膜囊泡較大腦皮層多，較坐骨神經少。免疫組織化學和酶細胞化學結果顯示：血-腦屏障標記物GLUT-1和ALP在視神經的各個分段、大腦皮層和坐骨神經微血管內皮細胞均陽性表達，陽性表達的微血管數+++；其它血-腦屏障

4、標記物在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段、大腦皮層陽性表達，陽性表達的微血管數+++，而在篩板前區(qū)和坐骨神經微血管內皮細胞無表達。與此相對照，內源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段、大腦皮層染色陰性，而在篩板前區(qū)和坐骨神經微血管內皮細胞染色陽性。以上結果表明：視神經的篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段在結構和功能上與血-腦屏障的特性相似，而篩板前區(qū)在結構和功能上更接近血-坐骨

5、神經屏障特性。 第二部分糖尿病大鼠血-視神經屏障的變化 本研究采用20只腹腔內注射鏈脲霉素誘導的4個月糖尿病大鼠，用透射電鏡觀察糖尿病大鼠視神經不同分段微血管超微結構變化(篩板前區(qū)、篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段)；利用免疫組織化學和酶細胞化學的方法檢測血-腦屏障標記物(同第一部分)的表達和內源性微血管通透性示蹤跡fibrinogen在糖尿病大鼠視神經不同分段微血管的通透性，旨在探討糖尿病時血-視神經屏障特性結

6、構和功能的變化。結果顯示：糖尿病大鼠視神經各個分段的微血管內皮細胞緊密連接均有間斷破壞，質膜囊泡較正常組顯著增多。免疫組織化學和酶細胞化學結果顯示：糖尿病時血-腦屏障標記物GLUT-1和ALP在視神經各個分段微血管的陽性表達數由正常的+++變?yōu)?；同樣，其它標記物在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段中的表達數也由正常的+++變?yōu)?。此外，內源性微血管通透性示蹤劑fibrinogen在篩板區(qū)、篩板后區(qū)、眶內段、管內段和顱內段微血管周