實(shí)驗(yàn)性胸腹撞擊傷后外源性CGRP對(duì)心肌細(xì)胞保護(hù)的研究.pdf

1、胸腹撞擊傷是平時(shí)意外事故，特別是交通事故中的常見傷類，患者大多有合并傷和或嚴(yán)重并發(fā)癥，病情兇險(xiǎn)。胸腹撞擊所致的鈍性心臟損傷以心肌挫傷(myocardialcontusion，MC)最為常見，發(fā)生率為9％～76％不等。胸腹撞擊傷后可引起機(jī)體血流動(dòng)力學(xué)不穩(wěn)定和多種細(xì)胞因子的釋放，從而造成繼發(fā)性器官損害。這種狀態(tài)若得不到及時(shí)糾正，是胸腹撞擊傷后重要的死亡原因之一，也是臨床救治工作中的重點(diǎn)與難點(diǎn)。因此，早期預(yù)防與治療胸腹撞擊傷后因心臟功能障礙造

2、成的血液循環(huán)紊亂和炎性因子失衡帶來的繼發(fā)性損害是臨床救治的關(guān)鍵所在。近年來研究發(fā)現(xiàn)降鈣素基因相關(guān)肽(Calcitonin-gene-relatedPeptide,CGRP)具有強(qiáng)烈的擴(kuò)血管作用，且可抑制創(chuàng)傷后血管收縮因子的釋放，阻斷體內(nèi)過氧化反應(yīng)，同時(shí)對(duì)損傷后的心肌具有一定的保護(hù)作用。本研究通過建立胸腹撞擊傷動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上，采用不同劑量的外源性降鈣素基因相關(guān)肽預(yù)處理、檢測(cè)胸腹撞擊傷傷前與傷后血管內(nèi)皮素的水平，同時(shí)測(cè)定典型心臟損傷因子，

3、觀察外源性降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)創(chuàng)傷后兔心功能的影響及其可能的作用機(jī)制，以期能為臨床救治提供較可靠的理論依據(jù)。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇成年新西蘭兔，雌雄不限，將其隨機(jī)分為A、B、C三組。A組：對(duì)照組；B組：常規(guī)劑量降鈣素基因相關(guān)肽處理組(0.012μg/kg)；C組：大劑量降鈣素基因相關(guān)肽處理組(0.024μg/kg)。BIM-Ⅳ型生物撞擊機(jī)撞擊動(dòng)物劍突致傷。測(cè)定不同時(shí)相點(diǎn)外周血LDH、CK、ET、cTnT及處死動(dòng)物后心臟組織內(nèi)MDA、

4、SOD及游離細(xì)胞鈣離子的平均熒光強(qiáng)度。同時(shí)對(duì)心、肺、肝損傷的嚴(yán)重程度進(jìn)行AIS評(píng)分和AAST分級(jí)、光鏡下觀察心臟損傷及合并肝、肺損傷的組織病理學(xué)特點(diǎn)。 本研究的主要結(jié)果與結(jié)論如下： 1.本研究建立的肝臟撞擊傷模型具有如下特點(diǎn)：①撞擊設(shè)備操作簡便、物理參數(shù)容易控制、撞擊部位準(zhǔn)確及可重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)；②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心臟損傷的臨床病理、類型、傷情與臨床較為接近；③撞擊傷的同時(shí)合并有肋骨骨折、心、肝、肺的損傷，AIs評(píng)分1～5分；④可

5、利用致傷模型進(jìn)行力學(xué)因素分析及多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的檢測(cè)；⑤為臨床研究胸腹撞擊傷后各種病理生理變化提供了理想的模型基礎(chǔ)。 2.本研究發(fā)現(xiàn)，傷前各組間血清ET、LDH、CK水平比較無明顯差異(P＜0.05)，胸腹撞擊傷后(傷后1、3、7h)，LDH、CK、ET值均顯著高于傷前(P＞0.01)，B組、C組非常顯著低于A組(P＜0.01)，C組非常顯著低于B組(P＜0.01)。 試驗(yàn)結(jié)果表明外源性CGRP能夠顯著減低外周血ET的水平且

6、呈劑量依賴性，在液體復(fù)蘇的同時(shí)，靜脈應(yīng)用CGRP后，血清cTnT、LDH、CK變化明顯小于單純液體復(fù)蘇組，且呈劑量依賴性，說明CGRP對(duì)嚴(yán)重創(chuàng)傷后心肌損傷有保護(hù)作用。其作用機(jī)制是CGRP阻斷了因創(chuàng)傷后血液內(nèi)ET含量的升高而引發(fā)的血管的強(qiáng)烈收縮及加重心肌損傷的酶的活性增強(qiáng)，而導(dǎo)致的惡性循環(huán)這兩個(gè)主要環(huán)節(jié)的發(fā)生。目前國內(nèi)外對(duì)于CGRP和ET相互作用的研究，主要集中于肝臟慢性疾病和神經(jīng)系統(tǒng)類病變，而在胸腹撞擊傷中直接利用外源性CGRP保護(hù)心肌

7、功能尚未見報(bào)道。 本研究發(fā)現(xiàn)，傷前三組心肌組織內(nèi)MDA、SOD、cT-nT含量無明顯差異(P＜0.05)，傷后B組、C組非常顯著低于A組(P＜0.01)，且C組明顯低于B組(P＜0.05)；SOD活性B組、C組非常顯著高于A組(P＜0.01)，且C組明顯高于B組(P＜0.05)；同時(shí)心肌細(xì)胞內(nèi)[ca2+]平均熒光強(qiáng)度B組、C組非常顯著低于A組(P＜0.01)，且C組明顯低于B組(P＜0.05)。 試驗(yàn)結(jié)果表明外源性補(bǔ)充C

8、GRP能劑量依賴性地下調(diào)MDA。并使SOD活性升高，同時(shí)其對(duì)脂質(zhì)過氧化的影響作用與心肌細(xì)胞的損傷程度呈高度相關(guān)性，說明CGRP抗脂質(zhì)過氧化作用參與了保護(hù)心肌細(xì)胞。CGRP與受體結(jié)合后，激活腺苷酸環(huán)化酶，防止細(xì)胞內(nèi)鈣超載、防止創(chuàng)傷后心肌酶漏出和維持心肌細(xì)胞膜穩(wěn)定性是其心肌細(xì)胞保護(hù)作用的三個(gè)主要機(jī)制。 3.本研究進(jìn)一步證實(shí)，創(chuàng)傷后外源性補(bǔ)充CGRP可有效解決因血管收縮因子增高而引發(fā)的血管持續(xù)收縮和心肌細(xì)胞持續(xù)缺血、缺氧情況。同時(shí)，其