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文檔簡介
1、研究分娩的發(fā)生機制,已成為國內(nèi)外圍產(chǎn)醫(yī)學研究的熱點和難點問題。對于分娩動因的闡釋目前較一致公認的是:分娩發(fā)動的特征性表現(xiàn)為子宮平滑肌的節(jié)律性收縮和宮頸口的進行性擴張。這也就使平滑肌收縮的研究成為研究分娩發(fā)動機制的關鍵所在。
在前期研究中,我課題組已應用基因芯片技術對人類臨產(chǎn)與未臨產(chǎn)子宮體部和子宮下段基因表達譜進行了研究,得到了人類臨產(chǎn)與未臨產(chǎn)子宮體部與子宮下段的差異基因表達譜,隨后用蛋白質(zhì)組學技術篩查,建立了臨產(chǎn)前后人子宮
2、平滑肌的差異蛋白表達譜,鑒定了Transgelin、Calponin-1等20種蛋白質(zhì)。本研究擬在前期工作基礎上,通過對Calponin-1和Transgelin在分娩發(fā)動過程中表達變化的研究,探明兩者在分娩發(fā)動中調(diào)節(jié)平滑肌收縮的作用機制。
Calponin-1和Transgelin都屬于Calponin蛋白家族,分子結(jié)構(gòu)主要由氨基末端的單一CH結(jié)構(gòu)域(Calponinhomologydomain)和羧基末端calponi
3、n樣重復模體(calponin-likerepeatCLR)的單拷貝或多拷貝的串聯(lián)重復序列組成。Calponin-1和Transgenlin是分化標志蛋白,在分化型平滑肌細胞中大量表達。兩者都屬于鈣結(jié)合蛋白,均可與肌動蛋白結(jié)合,具有多種生物功能。但關于Calponin-1和Transgelin在分娩發(fā)動中的作用及作用機制的研究在國內(nèi)外尚未見報道。
目的:探討Calponin-1和Transgelin在臨產(chǎn)前后子宮平滑肌組織
4、中的表達及意義,探討其在分娩發(fā)動中的作用機制。
方法:選取14例初產(chǎn)婦的子宮體部及子宮下段平滑肌組織,分為未臨產(chǎn)組及臨產(chǎn)組。分別用免疫組化及WesternBlot檢測Calponin-1和Transgenlin的表達水平。
結(jié)果:免疫組化檢測:Calponin-1和Transgelin陽性染色見于平滑肌細胞胞漿,兩者在已臨產(chǎn)和未臨產(chǎn)組子宮平滑肌細胞內(nèi)均為陽性表達?;叶戎翟酱?,則表達強度弱。在子宮體部平滑肌,未
5、臨產(chǎn)組與臨產(chǎn)組Calponin-1蛋白陽性表達的平均灰度值分別為184.90±5.13和167.32±5.21,兩組比較差異具有顯著性(P<0.05);在子宮下段平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Calponin-1蛋白陽性表達的平均灰度值分別為174.55±4.82和165.45±4.56,兩組比較差異具有顯著性(P<0.05)。在子宮體部平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Transgelin蛋白陽性表達的平均灰度值分別為170.82±4.25和160.
6、72±3.97,兩組比較差異具有顯著性(P<0.05);在子宮下段平滑肌,在未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Transgelin蛋白陽性表達的平均灰度值分別為160.83±4.39和163.94±4.11,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
WestemBlot檢測:灰度值大,則表達強度強。在子宮體部平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Calponin-1蛋白相對表達量由0.373±0.092升高至0.865±0.084,兩組比較差異具有顯著
7、性(P<0.05);在子宮下段平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Calponin-1蛋白相對表達量由0.522±0.102升高至0.957±0.081,兩組比較差異具有顯著性(P<0.05)。在子宮體部平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Transgelin蛋白相對表達量由1.823±0.105升高至4.236±0.130,兩組比較差異具有顯著性(P<0.05);在子宮下段平滑肌,未臨產(chǎn)組和臨產(chǎn)組Transgelin蛋白相對表達量由1.830±0.084降至
8、1.825±0.097,兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
Calponin-1和Transgelin的免疫組化及WesternBlot檢測結(jié)果顯示,臨產(chǎn)組較未臨產(chǎn)組子宮平滑肌組織Calponin-1的表達明顯升高。臨產(chǎn)組較未臨產(chǎn)組子宮體部平滑肌組織中Transgelin的表達升高,臨產(chǎn)組較未臨產(chǎn)組子宮下段平滑肌組織中Transgelin的表達無顯著差異。
結(jié)論:提示子宮體部和下段平滑肌組織中的Cal
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