Myocardin在不同孕期及產(chǎn)后子宮平滑肌中的表達(dá)及功能研究.pdf

1、目的：
　　子宮是新生命的搖籃，在非妊娠期和妊娠的不同時(shí)期，對(duì)外界機(jī)械刺激和化學(xué)刺激很敏感，導(dǎo)致子宮平滑肌的舒縮變化。子宮平滑肌的每一次細(xì)微的變化都是為了適應(yīng)宮內(nèi)胎兒的生長(zhǎng)，隨著胎兒的生長(zhǎng)，宮體不斷變大，宮頸不斷縮短，子宮平滑肌維持著一定的緊張性，直至胎兒的順利娩出。在這一過程中，子宮內(nèi)的任意異常都可以引起嚴(yán)重的后果，如早產(chǎn)、難產(chǎn)、胎盤前置、胎盤早剝、甚至產(chǎn)后出血等，嚴(yán)重威脅著胎兒及母體的健康。Myocardin是一種促進(jìn)平滑肌分

2、化的蛋白，當(dāng)前大部分的研究都集中于血管平滑肌，Myocardin是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最關(guān)鍵的促血管平滑肌細(xì)胞分化因子，能有效激活SMC的分化程序。小鼠胚胎干細(xì)胞和未分化胚胎癌細(xì)胞不表達(dá)Myocardin，而在向平滑肌誘導(dǎo)的過程中出現(xiàn)了Myocardin的表達(dá);當(dāng)一些未分化的非平滑肌細(xì)胞導(dǎo)入Myocardin基因后，激活了系列平滑肌分化標(biāo)志物基因和蛋白的表達(dá)并向平滑肌分化。而Myocardin在子宮平滑肌特別是在妊娠期子宮平滑肌中的表達(dá)情況鮮

3、有報(bào)道，Myocardin在妊娠期間子宮平滑肌中的表達(dá)情況以及與妊娠的維持之間是否存在著聯(lián)系，將成為研討的方向。本研究通過檢測(cè)Myocardin以及SM22、SM-α-actin等平滑肌標(biāo)志基因在非孕、妊娠不同時(shí)期以及產(chǎn)后不同時(shí)期的大鼠子宮平滑肌組織中的表達(dá)，并與主動(dòng)脈平滑肌、心肌、骨骼肌中的表達(dá)做出對(duì)比，探討其在妊娠子宮平滑肌中的作用，為降低產(chǎn)科風(fēng)險(xiǎn)提供新的思路。
　　方法：
　　1、分別收集未孕(NP），懷孕7、12、1

4、5、18、19、20、21天(P7～P21)以及產(chǎn)后1、4、7天(PP1～PP7)雌性SD大鼠的子宮、心肌、主動(dòng)脈和骨骼肌組織，放入凍存管中，保存于-70℃冰箱中，用于液氮研磨，提取蛋白和RNA。
　　2、采用Western blot方法檢測(cè)Myocardin、SM22、SM-α-actin蛋白在未孕時(shí)期各組織中基礎(chǔ)表達(dá);同時(shí)檢測(cè)Myocardin在懷孕不同時(shí)期子宮組織中的表達(dá)情況以及SM22、SM-α-actin在子宮和主動(dòng)脈中

5、的表達(dá)情況。
　　3、采用RT-PCR方法檢測(cè)Myocardin、SM22、SM-α-actin、MKL-1、MKL-2mRNA在各組織中的基礎(chǔ)表達(dá);同時(shí)檢測(cè)子宮平滑肌和主動(dòng)脈平滑肌中，各基因在NP、P7～P21、PP1～PP7的表達(dá)情況。同時(shí)檢測(cè)Atrogin-1mRNA在各孕期的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、Myocardin在各組織中均有不同程度的表達(dá);SM22、SM-α-actin只在子宮平滑肌和主動(dòng)脈平滑肌

6、中有特有表達(dá)，且在主動(dòng)脈平滑肌中表達(dá)量明顯高于子宮平滑肌。
　　2、Myocardin、SM22、SM-α-actin、MKL-1、MKL-2mRNA在各組織中的基礎(chǔ)表達(dá)各不相同:Myocardin在心肌和主動(dòng)脈中的基礎(chǔ)表達(dá)較高，而SM22、SM-α-actin在子宮平滑肌和主動(dòng)脈平滑肌中的表達(dá)較高。MKL-1在骨骼肌中的表達(dá)量較高，EKL-2在骨骼肌和心肌中的表達(dá)量較高。
　　3、Myocardin、SM22、SM-α-a