大鼠血管外膜炎癥對(duì)內(nèi)皮功能的影響及通心絡(luò)的干預(yù)研究.pdf

1、目的： 長(zhǎng)期以來(lái)一直強(qiáng)調(diào)動(dòng)脈內(nèi)皮功能障礙/損傷是動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)的始動(dòng)因素并影響病變?nèi)^(guò)程。而血管外膜炎癥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化形成的影響未予重視。最近的研究證實(shí)，血管外膜炎癥在某些個(gè)體可成為AS啟動(dòng)的始發(fā)門戶，血管外膜的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)與AS病變程度相關(guān)。但關(guān)于血管外膜炎癥在AS發(fā)生中對(duì)內(nèi)膜和內(nèi)皮功能損傷的影響及作用機(jī)制尚不清楚。傳統(tǒng)通絡(luò)方藥通心絡(luò)超微粉劑能否抑制血管外膜炎癥引起的血管內(nèi)皮功能障礙國(guó)內(nèi)外

2、研究較少。為此本實(shí)驗(yàn)采用套管法建立大鼠頸動(dòng)脈外膜炎癥模型，并給予通心絡(luò)超微粉劑(TXL)干預(yù)治療，觀察血管外膜炎癥對(duì)血清一氧化氮(nitric oxide，NO)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)及血漿內(nèi)皮素(endothelin，ET)水平的影響。以探討血管外膜炎癥在動(dòng)脈硬化形成中的作用機(jī)制及通心絡(luò)超微粉劑的保護(hù)作用。 材料與方法 1、動(dòng)物模型制備和實(shí)驗(yàn)分組取30只12周齡的健康雄性W

3、istarKyoto大鼠，體重200～250克(購(gòu)買于吉林大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室)，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為3組，每組10只。 空白組：不予任何處理和干預(yù)。 外膜炎癥組：，行硅膠管包裹術(shù)，常規(guī)麻醉后，消毒頸部正中皮膚，解剖分離出右側(cè)頸總動(dòng)脈，右側(cè)頸總動(dòng)脈包裹硅膠管一周構(gòu)建模型。 通心絡(luò)(TXL)治療組：通心絡(luò)超微粉劑(800mg/kg·d)每日一次灌胃。TXL藥物應(yīng)用一周，行硅膠管包裹大鼠右側(cè)頸動(dòng)脈手術(shù)，術(shù)后繼續(xù)TXL

4、藥物應(yīng)用一周，行第二次手術(shù)留取標(biāo)本進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。 2、病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)術(shù)后取右側(cè)頸總動(dòng)脈包裹血管段及空白組右側(cè)頸總動(dòng)脈相應(yīng)血管段，常規(guī)病理蠟塊制作，切片，行HE染色，光鏡觀察動(dòng)脈外膜炎癥浸潤(rùn)程度及中膜、內(nèi)膜病變和管腔狹窄情況.并應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析測(cè)量?jī)?nèi)膜厚度、中膜厚度和管腔面積。 3、內(nèi)皮分泌功能指標(biāo)的檢測(cè)術(shù)后一周處死每組動(dòng)物，處死前心內(nèi)采血5ml，分別采用硝酸還原酶法檢測(cè)血清NO水平，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清NOS水平和血漿E

5、T濃度等反映內(nèi)皮分泌功能的指標(biāo)。 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1、光鏡下大鼠頸動(dòng)脈病理形態(tài)學(xué)改變光鏡下可見： 1、空白組：大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈外膜無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，中膜無(wú)增厚、內(nèi)膜完整無(wú)增生、管腔無(wú)狹窄。外膜炎癥組；包裹段血管外膜增厚，有大量炎

6、癥細(xì)胞浸潤(rùn)主要為巨噬細(xì)胞，大量新生滋養(yǎng)血管；中膜增厚，平滑肌細(xì)胞細(xì)胞排列及細(xì)胞數(shù)未見明顯變化，內(nèi)彈力板彎曲，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；內(nèi)膜完整，但有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)新生血管生成。TXL治療組可見外膜有少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，輕度增厚，無(wú)新生滋養(yǎng)血管、中膜輕度增厚無(wú)彈力板彎曲、內(nèi)膜無(wú)增生、管腔無(wú)明顯變窄。 2、內(nèi)膜厚度、中膜厚度和管腔面積測(cè)定：與空白組比較，外膜炎癥組大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈中膜厚度明顯增加，管腔面積明顯縮小(P<0.01)，但內(nèi)膜厚度增加

7、不明顯。TXL組大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈中膜厚度較外膜炎癥組增厚較少，管腔面積縮小較少。 2、血清NO、NOS及血漿ET檢測(cè)結(jié)果與空白組比較(58.91±1.42μmol/L)，外膜炎癥組血清NO含量明顯減少，(38.52±1.85μmol/L)，P<0.05，血清NOS含量增高(7.92±0.13μmol/L)，差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，血漿ET濃度也增高(135.93±3.67pg/L)，P<0.05。與外膜炎癥組比較

8、，TXL組血清NO和NOS含量均增高(50.61±1.87μmol/L，10.23±0.33μmol/L)，P<0.05，血漿ET濃度降低(109.14±3.04pg/L)，P<0.05，但較空白組增高(55.31±3.12pg/L)。 結(jié)論： 1、大鼠頸總動(dòng)脈外膜炎癥持續(xù)七天即可導(dǎo)致外膜、中膜動(dòng)脈粥樣硬化樣的病理改變。 2、在內(nèi)膜形態(tài)學(xué)改變尚不明顯前即可檢測(cè)到內(nèi)皮功能的損傷。 3、通心絡(luò)可減輕血管外膜炎