熱休克蛋白20在大鼠急性尿潴留膀胱中的表達及意義.pdf

1、背景及目的：
　　 急性尿潴留(Acute urinary retention，AUR)是臨床上常見的嚴重的排尿功能障礙，常導致嚴重逼尿肌收縮乏力(detrusor underactivity，DU)，其發(fā)病原因有很多種，臨床療效不理想，目前其病理機制仍不十分明確。
　　 正常的排尿功能，其動力必須依靠健全的與排尿有關的肌肉細胞，其中最重要的就是膀胱逼尿肌細胞(Detrusor smooth muscle cell，DS

2、MC)。根據經典的肌絲滑行理論，平滑肌的收縮有賴于粗細肌絲的相互滑動產生相對位移導致的肌細胞長度變化。這一過程牽涉到包括神經遞質和神經受體、各種收縮相關蛋白以及多種酶的激活等事件。而細胞骨架的完整性是維持平滑肌可收縮性的結構基礎，同時也是多種損傷機制導致的平滑肌收縮功能障礙的共同通路。膀胱逼尿肌作為一種特殊的平滑肌，其收縮的調控機制似乎與骨骼肌更為相似，即對于收縮力和收縮精確性要求較高，因此穩(wěn)定和精密的肌絲結構是保證逼尿肌正常收縮的基礎

3、。很多收縮相關蛋白(如鈣介素D，CaD)的異?？芍苯訉е卤颇蚣〖拥鞍椎漠悩嫞⑴c逼尿肌細胞肥大變性等病理狀態(tài)的發(fā)生機制密切相關。
　　 熱休克蛋白20(heat shock protein20，Hsp20)是小分子熱休克蛋白家族中的一員，是Kato等人于1994年從骨骼肌組織中提純αβ-晶體蛋白、熱休克蛋白27(heat shockprotein27，Hsp27)時發(fā)現的。Hsp20在全身各組織器官中都有表達，主要分布在骨骼肌

4、、心肌、血管平滑肌、胃腸平滑肌和膀胱逼尿肌等組織中。研究表明，Hsp20具有調節(jié)血管、胃腸、子宮平滑肌收縮等生物學功能。Sonemany Salinthone等人研究發(fā)現Hsp20通過PKA通路磷酸化，磷酸化的Hsp20可與細肌絲結合，使磷酸化的肌球蛋白不能與細肌絲發(fā)生作用，從而抑制收縮，保持肌肉的松弛。但Hsp20在膀胱逼尿肌收縮功能中的作用及機制尚未見報導。
　　 本研究采用充盈性膀胱測壓、肌條興奮性和收縮性測定、Weste

5、rn blot、免疫熒光染色及激光共聚焦等技術，通過對比研究AUR大鼠不同時相點膀胱逼尿肌收縮力及Hsp20的表達情況，初步探討AUR后膀胱收縮功能和Hsp20表達的關系及相關機制，旨在為臨床治療提供新的思路。
　　 方法：
　　 本課題以成年雌性SD大鼠為研究對象，通過結扎尿道口的方法建立大鼠急性尿潴留動物模型，利用充盈性膀胱測壓的方法檢測不同時相點(0h、1h、6h、12h、24h、3d、5d、7d)膀胱收縮功能變化

6、；行離體逼尿肌肌條實驗，觀察大鼠逼尿肌肌條興奮性及收縮性的變化；采用免疫熒光染色的方法分別檢測急性尿潴留膀胱排空后不同時相點(0h、1h、6h、12h、24h、3d、5d、7d)大鼠膀胱逼尿肌Hsp20的表達情況；采用Western blot的方法比較尿潴留后不同時相點Hsp20含量的差異。初步探討急性尿潴留后膀胱收縮功能改變與熱休克蛋白20表達變化的關系及相關機制。實驗結果用均數士標準差(x±S)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件

7、處理。樣本均數間比較采用配對t檢驗。結果以P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著。
　　 結果：
　　 1、AUR后1h、6h、12 h、24 h大鼠逼尿肌收縮力(單位：cmH2O52.94±2.40、41.13±2.18、39.14±3.76、32.16±2.30)呈時間依賴性遞減，均較0h組(60.65±4.81cmH2O)顯著下降(P<0.05)；3d、5d、7d組最大逼尿肌壓(單位：cmH2O42.32

8、±4.47、45.28±4.64、49.71±2.17)較1h、6h、12h和24h組顯著回升，但仍低于0h組和對照組(P<0.05)；。
　　 2、AUR組大鼠逼尿肌肌條收縮頻率較對照組明顯降低(P<0.05)，而且收縮幅度有降低趨勢。
　　 3、AUR各組Hsp20表達明顯高于對照組，梗阻后24h內Hsp20表達呈逐步上升趨勢，而24h至7d則是逐漸降低的，其差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結論：