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文檔簡介
1、神經(jīng)介素U(NeuromedinU,NMU)在調(diào)節(jié)攝食行為和能量平衡方面發(fā)揮著重要的作用,因此對NMU通路的研究非常必要,然而目前關(guān)于NMU通路與其他攝食相關(guān)通路的相互關(guān)系研究較少。 本文采用腦室注射的給藥方式,對大鼠NMU通路以及中樞黑皮質(zhì)素(MC)受體途徑(MC3/4R)的相互關(guān)系進行了初步的研究,同時通過對介導(dǎo)NMU活性的Neuromedin U 2 R(NMU2R)的小分子激動劑研究,進一步探討兩種相關(guān)通路的關(guān)系。
2、 1.中樞NMU對大鼠攝食量、攝水量和體重的影響為了觀察NMU在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中調(diào)節(jié)動物攝食行為的作用,向大鼠腦室內(nèi)注射NMU,通過測定大鼠攝食量、攝水量以及體重的變化,探討中樞系統(tǒng)中的NMU對動物攝食行為的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明,腦室注射NMU對大鼠食欲有顯著抑制作用,并能夠有效的降低大鼠的攝水量,抑制大鼠體重的增加。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的NMU能夠有效的調(diào)節(jié)動物的攝食行為。 2.中樞NMU抑制食欲作用受黑皮質(zhì)激素受體途徑部分介導(dǎo)為了研
3、究中樞NMU與中樞黑皮質(zhì)激素受體途徑在調(diào)節(jié)攝食行為方面的相互作用關(guān)系。對禁食或不禁食大鼠腦室注射NMU2R內(nèi)源性配體NMU和MC3/4R信號途徑高親和力的拮抗劑SHU9119,通過測定不同時間點大鼠攝食量和體重的變化,探討中樞NMU2R和黑皮質(zhì)素受體途徑在調(diào)節(jié)動物攝食行為上的作用及其相互關(guān)系。在向腦室內(nèi)同時注射NMU和SHU9119的情況下,NMU對大鼠的食欲抑制作用會部分受到MC3/4R信號途徑變化的影響;同樣,對SHU9119前處理
4、大鼠腦室內(nèi)注射NMU,NMU抑制食欲的作用也會明顯降低,其在攝食方面的作用被部分抑制。結(jié)果提示,NMU調(diào)節(jié)攝食行為的作用可能部分受MC受體途徑介導(dǎo)。 3.NMU2R小分子激動劑的活性分析為了檢測已篩選出來的NMU2R小分子激動劑的活性大小,利用NMU2R細胞株,采用報告基因的方法檢測各種化合物的濃度-響應(yīng)值關(guān)系,并比較各種化合物EC50的大小,從而選擇響應(yīng)值較好的化合物。 結(jié)果顯示,多種化合物對NMU2R的激活作用有劑量
5、-依賴關(guān)系,EUK2040、EUK2047及EUK2085均具有良好的活性,EC50分別為16.666μM,33.723μM和47.044 μM。 4.腦室注射EUK2085對大鼠攝食量、攝水量以及體重的影響EUK2085是體外篩選出的NMU2R小分子激動劑,在細胞水平上具有一定的活性。通過腦室注射的方式將NMU2R的小分子激動劑EUK2085注射給大鼠,進行攝食行為以及部分相關(guān)基因(NMU、POMC和MC4R)表達情況的研究,結(jié)果顯示
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