小分子L1激動劑trimebutine促進小鼠脊髓損傷功能恢復.pdf

1、背景：脊髓損傷是一種嚴重的致殘性疾病，它分為原發(fā)性機械損傷和繼發(fā)性損傷兩種。由于損傷部位缺乏有效的損傷抑制機制和難以逆轉(zhuǎn)的病理反應，治愈脊髓損傷疾病是非常具有挑戰(zhàn)性的。神經(jīng)細胞粘附分子L1可促進軸突的再生，促進神經(jīng)元存活和突觸的可塑性，故可促進脊髓損傷后神經(jīng)再生。以往研究已經(jīng)證實可與L1結(jié)合的小分子模擬物具有類似L1的作用，且鑒于直接將L1用于臨床治療人類的脊髓損傷存在諸多不便，本課題旨在研究L1兩個模擬物曲美布汀（trimebutin

2、e maleate）與和厚樸酚（honokiol）在脊髓損傷修復中的作用。
　　目的：本課題探究曲美布汀與和厚樸酚在脊髓損傷小鼠模型中是否可以促進神經(jīng)再生和功能的恢復并探討相關機制。
　　方法：將脊髓損傷后的雌性小鼠隨機分為3組，每組六只，分別給予注射DMSO、trimebutine和 honokiol。
　　1.運用BMS評分和平衡木實驗觀察三組小鼠的運動功能恢復情況；
　　2.運用HE染色、免疫組化和免疫熒光

3、觀察形態(tài)學上三組小鼠的神經(jīng)元再生和神經(jīng)功能恢復情況；
　　3.運用蛋白印跡法觀察L1介導的信號通路是否被激活，從而推測L1模擬物激動劑發(fā)揮作用的機制；
　　4.運用小鼠小腦顆粒細胞原代培養(yǎng)來觀察體外實驗中trimebutine和 honokiol的相關作用。
　　結(jié)果：
　　1.行為學結(jié)果：BMS評分顯示trimebutine組小鼠地面運動功能明顯好于溶劑對照組小鼠。與溶劑對照組小鼠相比，F(xiàn)oot-steppin

4、g angle和rump-height index顯示trimebutine組小鼠后肢運動功能在第六周顯著改善，而Honokiol組小鼠運動功能改善不明顯。
　　2.形態(tài)學結(jié)果：與溶劑對照組相比，trimebutine組小鼠損傷面積和損傷部位星形膠質(zhì)細胞聚集程度明顯降低，神經(jīng)元再生增強、L1水平和神經(jīng)微絲蛋白水平顯著升高、CK2通路激活水平顯著增高（P<0.05），而honokiol組小鼠則并不顯著。
　　3.分子生化結(jié)果：