復(fù)合血管生成素的人工真皮替代物的構(gòu)建及其移植實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、近30年來，隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，已開發(fā)出多種真皮替代物，與自體的各種厚度的移植皮片相比，目前的各種真皮替代物均缺乏血管叢結(jié)構(gòu)，其血管化速度遠(yuǎn)不及自體斷層皮片，這是目前各種組織工程化皮膚移植成功率明顯低于自體斷層皮片的重要原因之一。血管生成素是迄今為止唯一一個(gè)基于其促進(jìn)血管新生能力而被發(fā)現(xiàn)和分離純化的促血管生成因子，其促進(jìn)血管生成能力非常強(qiáng)，將血管生成素引入到人工真皮替代物中，用控制釋放的方法來促進(jìn)其血管化，有望解決真皮替代物移植成功

2、率差的問題。 本研究用冷凍一凍干法制備了膠原／殼聚糖多孔支架，并用1-乙基-3-(二甲基胺丙基)-碳化二亞胺(EDC)和N-羥基丁二酰亞胺(NHS)對其交聯(lián)，同時(shí)進(jìn)行肝素接枝，利用血管生成素與肝素的親和性，將血管生成素引入到肝素化膠原／殼聚糖多孔支架中。研究中考察了肝素化膠原／殼聚糖多孔支架的微觀結(jié)構(gòu)、吸水率及體外酶解降解率，用放射標(biāo)記技術(shù)研究肝素化對真皮支架結(jié)合血管生成素的影響，并進(jìn)一步用放射標(biāo)記技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附法(ELIS

3、A)考察了血管生成素的體外釋放行為。應(yīng)用兔耳背皮下埋植模型對復(fù)合血管生成素的肝素化膠原／殼聚糖多孔支架的體內(nèi)血管化情況進(jìn)行了研究，并進(jìn)一步用大鼠全層皮膚缺損模型進(jìn)行一步法復(fù)合移植，觀察了移植皮片成活情況、皮片收縮情況、皮片組織學(xué)變化、移植物血管化情況及真皮支架的組織反應(yīng)性，以驗(yàn)證復(fù)合血管生成素的肝素化膠原／殼聚糖多孔支架作為人工真皮替代物應(yīng)用的可能性。 結(jié)果表明，肝素化膠原／殼聚糖多孔支架具有合適的孔徑和三維多孔結(jié)構(gòu)，并具有較高