梗阻性黃疸大鼠骨骼肌神經(jīng)肌肉接頭處乙酰膽堿受體的改變.pdf

1、第一部分梗阻性黃疸大鼠動物模型的建立
　　 目的：
　　 建立梗阻性黃疸(OJ)大鼠動物模型。
　　 方法：
　　 清潔級雄性Wistar大鼠30只，體重240-260g，隨機(jī)對照原則分五組:結(jié)扎膽總管后4天組、結(jié)扎膽總管后7天組、結(jié)扎膽總管后10天組、假手術(shù)組、空白對照組。實(shí)驗(yàn)前12h禁食，自由飲水。3％戊巴比妥鈉50mg/kg腹腔注射麻醉后，碘伏消毒，劍突下行腹正中切口開腹2cm左右，清晰暴露肝門。游

2、離大鼠膽總管，4-0手術(shù)絲線沿膽總管肝門處結(jié)扎膽總管。縫合，關(guān)腹，溫箱內(nèi)等待大鼠蘇醒。假手術(shù)組僅開腹游離膽總管，未做其他處理。空白對照組未作處理。
　　 結(jié)果：
　　 肉眼觀察黃疸情況:各手術(shù)組Wistar大鼠，鞏膜明顯黃染，四肢皮膚無毛覆蓋部位黃染明顯，空白組及假手術(shù)組未見黃染;實(shí)驗(yàn)室檢查:各手術(shù)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素及直接膽紅素明顯高于空白對照組和假手術(shù)組，差異顯著，P＜0.05;空白對照組和假手術(shù)組無顯

3、著性差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 膽總管結(jié)扎致大鼠膽道阻塞，肝生化指標(biāo)增高，肉眼觀察各手術(shù)組黃疸明顯，梗阻性黃疸(OJ)大鼠動物模型建立成功。
　　 第二部分梗阻性黃疸大鼠神經(jīng)肌肉接頭處乙酰膽堿受體的改變
　　 背景：
　　 臨床常見梗阻性黃疸(obstructive jaundice，OJ)，常由于膽道阻塞所致。臨床研究證實(shí)，全身麻醉應(yīng)用非去極化肌松藥起效緩慢、蘇醒延遲，但具體機(jī)制

4、不明。目前國內(nèi)外研究局限于兩方面:一是肌松藥的藥代動力學(xué)，即由于膽道阻塞，藥物肝臟代謝后排泄受阻;二，梗阻性黃疸本身引起的病理生理改變，肝臟合成白蛋白能力下降，導(dǎo)致組織間隙水腫，細(xì)胞外液增多，藥物分布容積增大，血藥濃度升高緩慢，藥物起效時(shí)間延長。梗阻性黃疸患者藥物的表觀分布容積增加以及膽汁排泄障礙會引起患者藥物代謝緩慢，藥物作用時(shí)間延長，蘇醒延遲。但作為非去極化肌松藥作用靶點(diǎn)的神經(jīng)肌肉接頭處乙酰膽堿受體，是否由于OJ改變不清楚，是否為影

5、響因素也未知。
　　 目的：
　　 探討梗阻性黃疸大鼠骨骼肌神經(jīng)肌肉接頭處乙酰膽堿受體數(shù)量的改變。
　　 方法：
　　 清潔級雄性Wistar大鼠30只，體重240-260g，隨機(jī)分成空白對照（Ⅰ組）、假手術(shù)（Ⅱ組）、結(jié)扎膽總管后4天（Ⅲ組）、結(jié)扎膽總管后7天（Ⅳ組）、結(jié)扎膽總管后10天（Ⅴ組）共5組，每組6只。實(shí)驗(yàn)前12h禁食，自由飲水。3％戊巴比妥鈉50mg/kg腹腔注射麻醉后，碘伏消毒，劍突下行腹正

6、中切口開腹2cm左右，清晰地暴露出肝門。小心的游離大鼠的膽總管，4-0手術(shù)絲線沿膽總管肝門處結(jié)扎膽總管。隨后縫合，關(guān)腹，溫箱內(nèi)等待大鼠蘇醒。假手術(shù)組僅開腹游離膽總管，未做其他處理，然后關(guān)腹?？瞻讓φ战M未作處理。實(shí)時(shí)定量PCR法(RT-PCR)檢測空白組（Ⅰ組），假手術(shù)組（Ⅱ組），結(jié)扎膽總管4天（Ⅲ組），結(jié)扎膽總管7天（Ⅳ組），結(jié)扎膽總管10天（Ⅴ組）的梗阻性黃疸模型大鼠骨骼肌乙酰膽堿受體α1亞基、ε亞基的表達(dá);Western-blott

7、ing檢測各組骨骼肌乙酰膽堿受體α1亞基的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 空白對照組、假手術(shù)組、結(jié)扎膽總管4天、7天、10天后的梗阻性黃疸大鼠骨骼肌乙酰膽堿受體的α1亞基、ε亞基在基因水平、受體α1亞基蛋白水平的表達(dá)無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 梗阻性黃疸大鼠骨骼肌乙酰膽堿受體α1亞基、ε亞基的表達(dá)與空白對照組大鼠骨骼肌乙酰膽堿受體α1亞基、ε亞基的表達(dá)無差異;梗阻性黃疸時(shí)非去極化肌松藥