歐前胡素,異歐前胡素,芍藥苷對(duì)人表皮黑素細(xì)胞生物活性及遷移的影響.pdf

1、 目的：通過(guò)體外建立模擬正常生理狀態(tài)的人表皮黑素細(xì)胞培養(yǎng)體系,觀察白芷的兩種主要單體歐前胡素、異歐前胡素和白芍的主要單體芍藥苷對(duì)黑素細(xì)胞生物活性及遷移的影響,從而探討這三種中藥單體對(duì)黑素細(xì)胞的作用機(jī)制,為色素性疾病的治療提供新的思路。方法：1、體外培養(yǎng)模擬皮膚正常生理狀態(tài)的人表皮黑素細(xì)胞；2、檢測(cè)不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對(duì)黑素細(xì)胞增殖活性的影響(MTT法)；3、檢測(cè)不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前

2、胡素、芍藥苷)對(duì)黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響(L-DOPA法)；4、檢測(cè)不同濃度的三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對(duì)黑素細(xì)胞黑素合成的影響( NaOH 法)；5、采用Transwell小室檢測(cè)三種中藥單體(歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷)對(duì)黑素細(xì)胞遷移的影響。以上全部數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件17.0版進(jìn)行分析。結(jié)果：1、歐前胡素組在濃度為 20μg/mL 和 50μg/mL 時(shí)；異歐前胡素組在濃度為5μg/mL、10μg/mL、

3、20μg/mL 時(shí)；芍藥苷組在濃度為 5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 時(shí)均顯示出顯著的促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖的作用。各組中藥單體在 100μg/mL 時(shí)并未對(duì)黑素細(xì)胞增殖產(chǎn)生明顯的抑制作用,細(xì)胞仍顯示較好的生長(zhǎng)。各組中藥單體對(duì)黑素細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用均是低濃度時(shí)呈濃度依賴性增強(qiáng),而較高濃度時(shí)反而作用力度下降,由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn),10μg/mL為芍藥苷和補(bǔ)骨脂素的最佳作用濃度；20μg/mL 為歐前胡素和異歐前胡素的最佳

4、作用濃度。其中5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL濃度時(shí)的異歐前胡素組促細(xì)胞增殖能力強(qiáng)于同濃度的補(bǔ)骨脂素組。2、歐前胡素組在濃度為20μg/mL、50μg/mL 時(shí)；異歐前胡素組在濃度為 10μg/mL、20μg/mL 時(shí)；芍藥苷組在10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL濃度時(shí)；均顯示出上調(diào)黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性的作用,并且其作用強(qiáng)度與同濃度的補(bǔ)骨脂素組相似。各組中藥單體對(duì)調(diào)節(jié)黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性的作用也呈現(xiàn)出低濃度時(shí)劑量

5、依賴性上調(diào),而高濃度時(shí)上調(diào)能力逐漸下降。10μg/mL 為異歐前胡素和芍藥苷的最佳作用濃度；20μg/mL 為歐前胡素和補(bǔ)骨脂素的最佳作用濃度。3、歐前胡素組在濃度為2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 時(shí)均未顯示出對(duì)黑素合成的促進(jìn)作用；異歐前胡素組僅在20μg/mL時(shí)顯著促進(jìn)黑素合成；芍藥苷組在濃度為 20μg/mL、50μg/mL 時(shí)顯著的促進(jìn)黑素合成。異歐前胡素組、芍藥苷

6、組、補(bǔ)骨脂素組促進(jìn)黑素合成的作用均是低濃度時(shí)劑量依賴性上調(diào),高濃度時(shí)下降。20μg/mL 為異歐前胡素和補(bǔ)骨脂素的最佳作用濃度；50μg/mL 為芍藥苷的最佳作用濃度。4、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 的歐前胡素組均無(wú)明顯促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移的作用；異歐前胡素組在這三個(gè)濃度時(shí)促黑素細(xì)胞遷移的作用呈現(xiàn)濃度依賴性加強(qiáng),并于20μg/mL和50μg/mL時(shí)顯示出極顯著的促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移的作用,與空白對(duì)照組比較在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性

7、差異(P<0.01)；芍藥苷組在20μg/mL時(shí)極顯著的促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移,與空白對(duì)照組比較在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性差異(P<0.01)；補(bǔ)骨脂素組(陽(yáng)性對(duì)照組)在 10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL 三個(gè)濃度均顯著的促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移,其中20μg/mL時(shí)其作用強(qiáng)度最高；50μg/mL濃度組的異歐前胡素和補(bǔ)骨脂素均極顯著的促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移,與空白對(duì)照組比較在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著性差異(P<0.01),并且此時(shí)兩者作用強(qiáng)度相當(dāng)。結(jié)論：1

8、、歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷均能促進(jìn)黑素細(xì)胞的增殖,且在較高濃度(100μg/mL)時(shí)對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性作用,證實(shí)了這三種中藥單體的安全性。并且異歐前胡素促黑素細(xì)胞增殖活性能力強(qiáng)于補(bǔ)骨脂素。2、歐前胡素、異歐前胡素、芍藥苷均能上調(diào)黑素細(xì)胞酪氨酸酶的活性,且作用強(qiáng)度與補(bǔ)骨脂素相似。3、異歐前胡素和芍藥苷均能促進(jìn)黑素細(xì)胞的黑素合成,而歐前胡素未檢測(cè)出促進(jìn)黑素合成的作用。4、20μg/mL、50μg/mL組的異歐前胡素和20μg/mL組的芍藥