復方羊藿三七片主成分腸吸收動力學研究.pdf

1、藥物劑型是藥物使用的必備形式。藥物劑型設計合理與否直接影響到臨床藥效的發(fā)揮。中藥復方是中醫(yī)藥用藥之一大特色，其主要給藥方式—口服給藥必須經(jīng)過胃腸吸收才能發(fā)揮全身作用。中藥復方劑型設計多依據(jù)于臨床用藥需求以及病人的依從性、藥物的理化性質(zhì)，很少有從藥物腸吸收特性角度設計中藥復方劑型。本研究以復方羊藿三七片為模型藥物，利用大鼠在體腸灌注模型和Caco-2細胞模型對其主成分腸吸收動力學進行研究，提供中藥體內(nèi)過程的參數(shù)，為進一步開發(fā)中藥新劑型、研

2、制高質(zhì)量的中藥新制劑提供依據(jù)。 1、本論文首先制備了模型藥物，并對模型藥物進行質(zhì)量控制。復方羊藿三七片由淫羊藿和三七組成。以淫羊藿中5種黃酮類成分和三七中3種皂苷類成分為指標，采用HPLC-DAD-ELSD的方法對受試藥物進行質(zhì)量控制，保證受試藥物含量的穩(wěn)定性。以淫羊藿苷計，每101.3mg淫羊藿提取物，112.0mg復方羊藿三七提取物中則含淫羊藿苷3.38mg，而112.0mg復方羊藿三七提取物中所含有的三七中三種皂苷類成分的

3、量則與16.90mg三七提取物相當。即淫羊藿苷、三七提取物、朝鮮淫羊藿提取物、復方羊藿三七提取物的用量比為3.38：16.90：101.3：112.0。 2、建立了大鼠在體腸灌注模型，首次對中藥復方羊藿三七片主成分的腸吸收動力學進行研究。 (1)化合物的穩(wěn)定是藥物研究的必要性。為了保證Caco-2細胞模型實驗及大鼠腸灌注實驗的準確可靠，首先對化合物的化學穩(wěn)定性進行了考察。采用恒溫法，以pH值為5.5～8.0的Hank's

4、平衡鹽溶液(HBSS)作為溶解介質(zhì)，在37℃±0.5℃條件下考察幾種受試化合物在12小時內(nèi)的穩(wěn)定性。計算反應降解常數(shù)，實驗結果表明所考察的淫羊藿苷，朝鮮淫羊藿提取物中淫羊藿苷，復方羊藿三七提取物中淫羊藿苷，三七提取物中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rbl在pH值為5.5～8.0的HBSS中均比較穩(wěn)定，可以進行相應的在體離體實驗。 (2)對大鼠在體腸灌流樣品的分析方法學進行了研究。建立了淫羊藿苷、三七皂苷R1、人參皂苷Rg

5、1、人參皂苷Rbl大鼠在體腸灌注樣品的HPLC測定方法。實驗結果表明，淫羊藿苷、三七皂苷R1，人參皂苷Rg1，人參皂苷Rb1線性好，精密度、重復性、穩(wěn)定性、回收率符合要求，所建方法可行。 (3)應用大鼠在體腸灌注模型分別研究了單體淫羊藿苷、淫羊藿藥材中淫羊藿苷、復方中淫羊藿苷、三七中三種皂苷類成分的腸吸收動力學。結果表明單體淫羊藿苷十二指腸和空腸具有遠遠大于吸收較好的普萘洛爾(P*eft＞3.5)的表觀滲透系數(shù)是因為淫羊藿苷在腸

6、內(nèi)被快速代謝成兩種代謝產(chǎn)物。淫羊藿中及復方羊藿三七中淫羊藿苷在各腸段的表觀滲透系數(shù)和消除百分率較淫羊藿苷單體的低。淫羊藿藥材中淫羊藿苷和復方羊藿三七中淫羊藿苷的表觀滲透系數(shù)及消除百分率與單體淫羊藿苷有顯著性差異，而淫羊藿藥材中淫羊藿苷與復方羊藿三七中淫羊藿苷就各腸段的表觀滲透系數(shù)和消除百分率并沒有顯著性差異?？偟膩碚f，復方羊藿三七中淫羊藿苷會因淫羊藿中其他黃酮苷類成分競爭LPH酶的水解作用而使淫羊藿苷水解受到抑制，但其在腸段表現(xiàn)出的表觀

7、滲透系數(shù)和消除百分率主要還是因為酶的水解作用。 3、建立了Caco-2細胞培養(yǎng)模型，首次應用此模型對復方羊藿三七片中主成分的吸收轉(zhuǎn)運情況。 20μM淫羊藿苷的表觀滲透系數(shù)為(0.62±0.032)×10-6cm·s-1，淫羊藿苷的表觀滲透系數(shù)值不大，其腸吸收不是很好。而且試驗發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷B到A側的滲透系數(shù)遠遠大于A到B側的滲透系數(shù)(20μM，4.83倍)，提示淫羊藿苷在小腸吸收轉(zhuǎn)運的過程中可能會小腸上皮細胞所含的轉(zhuǎn)運蛋白

8、外排。淫羊藿苷單體吸收機制研究表明淫羊藿苷可能存在P-gp轉(zhuǎn)運蛋白的外排作用。淫羊藿藥材中淫羊藿苷或者復方羊藿三七中淫羊藿苷AP-BL側及BL-AP側的滲透系數(shù)較淫羊藿苷單體時的滲透系數(shù)小，外排作用減弱，透膜性也降低。 綜上，復方羊藿三七片中黃酮苷類成分淫羊藿苷在腸道會受到LPH酶的水解作用和P-gp轉(zhuǎn)運蛋白的外排作用，吸收不好。同時，復方中另一類主要成分一三七中的皂苷類成分的吸收也較差。因此，必須通過現(xiàn)代劑型設計方法減少復方羊