聯(lián)苯雙酯對(duì)環(huán)孢素A藥代動(dòng)力學(xué)的影響及其機(jī)制的遺傳藥理學(xué)研究.pdf

1、遺傳藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體是決定藥物體內(nèi)過(guò)程的關(guān)鍵因素，其活性的改變是導(dǎo)致藥物相互作用的主要機(jī)制。藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的遺傳多態(tài)性是導(dǎo)致藥物相互作用個(gè)體差異的重要決定因素。 環(huán)孢素A屬于鈣調(diào)磷酸酶抑制劑家族，主要通過(guò)特異性抑制淋巴細(xì)胞反應(yīng)和增生發(fā)揮抑制免疫排斥的功效。目前臨床上，環(huán)孢素A廣泛的應(yīng)用于器官移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的預(yù)防與治療，該藥物在療效發(fā)揮的同時(shí)，表現(xiàn)出明顯的藥物代謝動(dòng)力學(xué)個(gè)體差異以及狹窄的治療窗，由于藥物

2、相互作用導(dǎo)致的毒副反應(yīng)也十分常見。目前的研究證實(shí)，環(huán)孢素A在人體內(nèi)的代謝、轉(zhuǎn)運(yùn)以及與之相關(guān)的藥物相互作用的發(fā)生均與CYP3A4以及P糖蛋白的活性密切相關(guān)。針對(duì)環(huán)孢素A在人體內(nèi)的藥代學(xué)以及藥效學(xué)個(gè)體差異所開展的研究也多圍繞上述兩個(gè)功能蛋白開展。 細(xì)胞色素P450（CYP450）酶系由基因超家族編碼的酶蛋白組成，參與各種內(nèi)源性以及外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化。其中，CYP3A4是P450家族中的重要成員，主要表達(dá)在肝臟與小腸，參與了臨床50

3、％以上藥物的代謝，是環(huán)孢素A在人體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化過(guò)程中最重要的功能蛋白。目前的研究認(rèn)為，藥物對(duì)CYP3A4活性的影響，是導(dǎo)致環(huán)孢素A相關(guān)藥物相互作用的主要原因之一。CYP3A4作為機(jī)體重要功能蛋白的一種，其活性在基礎(chǔ)狀態(tài)下也存在顯著的個(gè)體差異。CYP3A4*18B是由日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)的具有功能意義的突變位點(diǎn)，最近的研究發(fā)現(xiàn)，該位點(diǎn)的突變與環(huán)孢素A在機(jī)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)的個(gè)體差異密切相關(guān)。其中，基因型為CYP3A4*18突變型純合子的受試者體內(nèi)環(huán)孢

4、素A的代謝顯著加強(qiáng)。 P-糖蛋白是由多藥耐藥基因MDR1編碼的一種能量依賴型藥物外排泵，在肝臟、小腸、腎臟等人體的多種組織中都有分布。對(duì)于各種藥物在人體的吸收、分布與消除均發(fā)揮重要作用。P-糖蛋白活性的高低與環(huán)孢素A在機(jī)體代謝的個(gè)體差異有著直接的聯(lián)系。 核受體中的孕烷X受體（pregnaneXreceptor，PXR）核組成性雄烷受體（constitutiveandrostanereceptor，CAR）對(duì)多種CYP45

5、0代謝酶以及轉(zhuǎn)運(yùn)體的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)發(fā)揮重要作用。目前，利用表達(dá)PXR或CAR的CYP450酶以及MDR1熒光素酶報(bào)告基因平臺(tái)，發(fā)現(xiàn)通過(guò)激動(dòng)PXR或CAR來(lái)發(fā)揮對(duì)下游靶基因產(chǎn)生誘導(dǎo)效應(yīng)的化學(xué)成分已經(jīng)成為新藥研發(fā)以及臨床藥學(xué)研究的重要手段之一。 聯(lián)苯雙酯（bifendate），是合成五味子素的中間體，是我國(guó)研制的降酶藥物，常用于肝病的治療。臨床研究發(fā)現(xiàn)該藥物可以通過(guò)穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，加強(qiáng)肝細(xì)胞損傷的修復(fù)，改善肝組織的病理?yè)p害。同時(shí)聯(lián)苯雙酯作為

6、一種重要的輔助藥物，常與環(huán)孢素A聯(lián)合使用，目的是降低環(huán)孢素A長(zhǎng)期服用帶來(lái)的肝毒性。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A的合用，確實(shí)能夠降低長(zhǎng)期服用環(huán)孢素A伴隨的肝臟損害，患者體內(nèi)的環(huán)孢素A的血藥濃度也出現(xiàn)明顯的下降。 基于以上研究背景，本課題旨在查明聯(lián)苯雙酯對(duì)CYP3A4以及藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體P-糖蛋白在人體產(chǎn)生的影響以及這種影響對(duì)聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A在機(jī)體的藥物相互作用機(jī)制探討的參考價(jià)值。通過(guò)雙熒光素報(bào)告基因在轉(zhuǎn)錄調(diào)控水平探討聯(lián)苯雙酯對(duì)CY

7、P3A4以及P-糖蛋白的影響；通過(guò)嚴(yán)格設(shè)計(jì)的臨床實(shí)驗(yàn)，探討在不同CYP3A4*18B基因型的健康受試者體內(nèi)，聯(lián)苯雙酯對(duì)環(huán)孢素A藥代動(dòng)力學(xué)的影響；以他林洛爾、咪噠唑侖為探藥，在整體藥代動(dòng)力學(xué)水平和藥物相互作用層面探討聯(lián)苯雙酯對(duì)CYP3A4以及P-糖蛋白活性的影響，為臨床上聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A藥物相互作用提供分子水平解釋，并為臨床聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A的合理應(yīng)用以及基因?qū)騻€(gè)體化治療提供指導(dǎo)。從整體水平，為初步探討聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A藥物相互作用的

8、機(jī)制提供線索。 本課題的主要研究結(jié)果如下： 1.在共轉(zhuǎn)染PXR表達(dá)質(zhì)粒和相應(yīng)啟動(dòng)子的雙熒光報(bào)告基因檢測(cè)中，聯(lián)苯雙酯顯著增加CYP3A4和MDR1的啟動(dòng)子活性；在共轉(zhuǎn)染CAR表達(dá)質(zhì)粒和相應(yīng)啟動(dòng)子的雙熒光報(bào)告基因檢測(cè)中，聯(lián)苯雙酯對(duì)CYP3A4和MDR1的啟動(dòng)子活性沒(méi)有顯著影響。 2.在不同CYP3A4*18B基因型個(gè)體中，研究聯(lián)苯雙酯對(duì)環(huán)孢素A藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯雙酯能夠顯著降低環(huán)孢素A血藥濃度，并且環(huán)孢素

9、A體內(nèi)藥代參數(shù)的變化程度在CYP3A4*18B基因型間有顯著差異。 3.用他林洛爾作為探藥，研究了聯(lián)苯雙酯對(duì)人體P-糖蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)體活性的影響，發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯雙酯降低了他林洛爾的血藥濃度，提示聯(lián)苯雙酯在人體內(nèi)顯著的誘導(dǎo)了P-糖蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)活性。 4.用咪噠唑侖作為探藥，研究了不同CYP3A4*18B基因型個(gè)體中聯(lián)苯雙酯對(duì)CYP3A4活性的影響，發(fā)現(xiàn)咪噠唑侖以及1-羥咪噠唑侖血藥濃度在應(yīng)用聯(lián)苯雙酯后顯著降低，并且咪噠唑侖與1-羥咪噠唑

10、侖的AUC（0-24），AUC（0-∞），和Cmax的變化程度在CYP3A4*18B不同基因型間有顯著差異，在CYP3A4*18B突變型純合子型中降低程度最顯著。 5.對(duì)PXR1207C>T突變?cè)谥袊?guó)漢族人群中的分布頻率進(jìn)行篩查，在80個(gè)DNA樣本中未發(fā)現(xiàn)突變的發(fā)生。 總之，本項(xiàng)目從基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，臨床整體水平為聯(lián)苯雙酯與環(huán)孢素A的臨床藥物相互作用和反應(yīng)的個(gè)體差異提供了遺傳藥理學(xué)的解釋，為臨床合理使用聯(lián)苯雙酯和環(huán)孢素A、B