烏司他丁和泰索帝對人乳腺癌增殖、侵襲及uPA、uPAR、ERK表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分烏司他丁和泰索帝對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖、侵襲的抑制以及對uPA、uPAR、ERK的表達(dá)的影響
　　 目的：探討烏司他?。║TI）和泰索帝（TXT）對體外培養(yǎng)的MDA-MB-231細(xì)胞（ER-）的增殖及侵襲能力的作用，以及對該細(xì)胞中的uPA（尿激酶型纖溶酶原激活物）、uPAR（尿激酶型纖溶酶原激活物受體）、ERK（細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶）表達(dá)水平的影響。
　　 方法：將MDA-MB-231細(xì)胞分為4組：對

2、照組（Control），烏司他丁組（UTI，濃度800U/ml），泰索帝組（TXT，濃度3.7μg/ml），烏司他丁+泰索帝組（UTI，濃度800U/ml，TXT，濃度3.7μg/ml）。運(yùn)用噻唑藍(lán)（MTT）法檢測以上各處理組細(xì)胞的增殖能力，Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的侵襲能力，實(shí)時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RQT-PCR）分別檢測各組細(xì)胞中uPA、uPAR、ERK的mRNA表達(dá)水平，免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western Bl

3、ot）檢測uPA、uPAR、p-ERK的蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：MDA-MB-231細(xì)胞在Control，UTI，TXT，UTI+TXT各組中的增殖能力和侵襲能力均依次降低。uPA和uPAR的基因及蛋白表達(dá)水平均可被UTI抑制，而被TXT上調(diào)；UTI和TXT對ERK的基因表達(dá)無明顯作用，但UTI對ERK的激活有抑制作用，而TXT對ERK的激活有促進(jìn)作用。
　　 結(jié)論：烏司他丁可抑制MDA-MB-231細(xì)胞的uPA、u

4、PAR、p-ERK表達(dá)，并可增強(qiáng)泰索帝的抗癌細(xì)胞增殖及侵襲的作用。
　　 第二部分烏司他丁和泰索帝對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231裸鼠移植瘤生長的抑制及對uPA、uPAR、p-ERK表達(dá)的影響
　　 目的：探討烏司他?。║TI）和泰索帝（TXT）對MDA-MB-231細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長的影響，以及對瘤組織中的uPA、uPAR、p-ERK表達(dá)水平的影響。
　　 方法：建立裸鼠移植瘤模型，分四組：對照組（Contr

5、ol，生理鹽水200μl/天/只），烏司他丁組（UTI，1600U/天/只），泰索帝組（TXT，10mg/7天/kg），烏司他丁+泰索帝組（UTI+TXT，按單藥劑量及頻次給藥）。用藥期間檢測腫瘤體積，并繪制腫瘤生長曲線。用藥21天后處死裸鼠，取腫瘤組織做病理切片及免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)，檢測uPA、uPAR）及p-ERK的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)束時對照組及UTI組各有一只裸鼠死亡。整個實(shí)驗(yàn)過程中，對照組及UTI組裸鼠移植瘤無

6、縮小，TXT及UTI+TXT組自用藥第13天開始至用藥結(jié)束腫瘤體積逐漸縮小。抑瘤率分別為：UTI組29.312％，TXT組86.021％，UTI+TXT組98.264％。uPA、uPAR及p-ERK的蛋白表達(dá)水平均可被UTI抑制，而被TXT上調(diào)，兩者聯(lián)用仍可下調(diào)三種蛋白，但下調(diào)程度較單用UTI弱。
　　 結(jié)論：烏司他丁可抑制MDA-MB-231細(xì)胞移植瘤中的uPA、uPAR及p-ERK的蛋白表達(dá)，并可增強(qiáng)泰索帝抗腫瘤生長的作用。