喹噁啉類對鯉應激反應的影響研究.pdf

1、喹噁啉類為人工合成的、具有喹噁啉-1，4-二氧基本結構的動物專用藥，具有提高飼料利用率、促進動物生長和廣譜抗菌作用，曾作為抗菌促生長劑在世界范圍內廣泛應用。本類早期品種喹乙醇和卡巴氧由于對人和動物有不同程度的毒副作用已被限制使用。中國農業(yè)科學院蘭州研究所八十年代研制的乙酰甲喹由于毒性大，主要作為抗菌劑使用。喹烯酮和喹賽多是新一代喹噁啉類抗菌促生長劑，毒性低，毒副作用小，對食品動物具有良好的促生長效果，在畜禽和水產養(yǎng)殖上具有廣闊的應用前景

2、。但目前的研究表明：超劑量使用喹乙醇導致魚類出現(xiàn)中毒反應，引起魚類抗應激力顯著降低，受到應激因子刺激后，呈現(xiàn)“應激性出血癥”?；卩惗?、喹烯酮與喹乙醇的化學結構相似，抗菌促生長機制相同，且有研究表明喹噁啉類普遍具有腎上腺毒性，這兩種添加劑會不會同樣對魚類的應激反應產生干擾作用，尚不清楚。同時，目前在喹乙醇對魚類應激性毒性的研究基本停留在常規(guī)生理生化指標測定、器官病理切片觀察上面，尚沒有深入到下丘腦-腦垂體-腎間組織(HPI)軸的水平上

3、，對應激激素皮質醇在血清中的含量變化及HPI軸組織結構的變化，尚未見報道。深入系統(tǒng)地了解喹乙醇、喹賽多和喹烯酮對魚類的生理學、毒理學及其對魚類應激軸的作用，對今后喹噁啉類在水產養(yǎng)殖中安全合理使用等方面提供了更可靠的科學依據。 試驗以鯉(CyprinuscarpioL.)為試驗對象，投喂添加不同劑量的喹乙醇、喹賽多和喹烯酮(50、150和500mg/kg)的飼料，于試驗的4、8和12wk末，每組隨機撈取鯉30尾分別于應激前、追逐及

4、24h限制應激后采樣。應激前測定鯉的增重、血液生理生化指標以及肝臟抗氧化指標，取鯉的頭腎、中腎、肝臟、腸道進行了組織病理學研究，探討了三種藥對鯉生理學和毒理學的影響；追逐和24h限制應激后測定血清生化指標，探討了這三種藥對鯉應激的影響，研究結果如下： 1.試驗期間，用藥各組平均增重與對照組相比均有不同程度提高。4和8wk各藥物同劑量組相比均無顯著差異(P>0.05)，僅12wk時喹乙醇500mg/kg組增重顯著低于同劑量下的喹賽

5、多和喹烯酮組(P<0.05)。結果表明：添加劑量為50～500mg/kg的喹賽多和喹烯酮具有明顯的促生長效果。50～500mg/kg喹乙醇也顯著提高鯉的生產性能，但其500mg/kg劑量下，促生長效果下降。隨著用藥時間的延長，喹賽多、喹乙醇和喹烯酮的促生長效果均有所下降。 2.隨著劑量的增加，喹乙醇各組的紅細胞總數(RBC)、血紅蛋白(HGB)和紅細胞壓積(HCT)均呈下降的趨勢，其500mg/kg組的RBC和HGB在各個時期均

6、顯著低于對照組及其他各藥物組(P<0.05)。喹賽多和喹烯酮50、150mg/kg組RBC、HGB和HCT呈上升的趨勢，但500mg/kg組各指標都有下降，8和12wk時，喹賽多500mg/kg組RBC顯著低于其50mg/kg組(P<0.05)，喹烯酮500mg/kg組RBC在各個時期均低于其50mg/kg組(P<0.05)。結果表明：50～150mg/kg的喹賽多和喹烯酮對鯉的健康狀態(tài)有促進作用，可促進紅細胞生成從而增加氧的供應，而5

7、00mg/kg的長期作用會給鯉的血液生理帶來負面作用。喹乙醇500mg/kg可能會干擾魚體的造血機能導致貧血。 3.4wk時，150和500mg/kg喹賽多和喹乙醇、500mg/kg喹烯酮能顯著提高血清皮質醇含量(P<0.05)。8和12wk后，鯉對藥物有良好的適應。血糖含量在喹賽多和喹烯酮各組均有上升的趨勢，但500mg/kg喹乙醇使其含量降低。喹乙醇500mg/kg組的血清天門冬氨酸轉氨酶(AST)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、

8、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)活性在各個時期均上升，喹賽多500mg/kg和喹烯酮組和喹乙醇150mg/kg組偶爾也有上升的情況。4wk時總膽紅素(TB)和直接膽紅素(DB)均無顯著變化(P>0.05)，至8和12wk時，其在喹乙醇500mg/kg組有顯著增高(P<0.05)。8和12wk時，血清白蛋白(ALB)含量在喹賽多150和500mg/kg組和喹烯酮150mg/kg組顯著升高(P<0.05)，但在12wk喹乙醇500

9、mg/kg組血清總蛋白(TP)和ALB含量顯著降低(P<0.05)。血清肌酐(CRE)含量僅在12wk喹乙醇150和500mg/kg組顯著增高(P<0.05)，尿素氮(BUN)在8和12wk喹乙醇500mg/kg組顯著增高(P<0.05)。血清離子在4和8wk時變化均不顯著(P<0.05)，12wk時變化范圍較大，喹乙醇500mg/kg組Na+顯著低于其他各組(P<0.05)，K+在該組12wk時顯著增高(P<0.05)，P在12wk時

10、喹賽多500mg/kg組、喹乙醇和喹烯酮150和500mg/kg組顯著升高(P<0.05)。各個時期膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)和CL-含量變化均不明顯(P>0.05)。結果表明，喹賽多和喹烯酮對鯉有較好的安全性，劑量為50～150mg/kg時，對鯉生理生化指標基本無明顯影響；長期使用劑量高于500mg/kg的喹賽多和喹烯酮對鯉生理機能產生輕微的不良影響；整個試驗周期內，500mg/kg喹乙醇對鯉的能量和物質代謝都有一定的破壞作用

11、。 4.應激后，皮質醇、血糖、天門冬氨酸轉氨酶(AST)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)和乳酸脫氫酶(LDH)有顯著變化(P<0.05)，可作為分析藥物對應激影響的重點指標。各時期喹乙醇500mg/kg組應激后的血清AST、ALT和ALP活性與各對照組應激后相比普遍升高，表明應激會加強喹乙醇對肝細胞膜的通透性和細胞間的代謝作用的損傷。喹賽多500mg/kg組、喹烯酮500mg/kg組和喹乙醇150mg/kg組的血清

12、AST、ALT和ALP活性在12wk應激后也有升高的情況。 5.在本試驗劑量范圍內，這三種藥都對超氧化物歧化酶(SOD)的活性表現(xiàn)為誘導作用，但隨飼養(yǎng)時間延長，對SOD活性的誘導作用減弱；各藥物150mg/kg能誘導谷胱甘肽-S轉移酶(GST)活性，而500mg/kg對其活性有所抑制，喹乙醇500mg/kg作用最為顯著(P<0.05)；而各組丙二醛(MDA)含量無明顯變化(P>0.05)。上述變化表明，劑量高于500mg/kg的

13、喹乙醇對鯉肝臟抗氧化機能有一定的破壞，而木試驗劑量范圍內的喹賽多和喹烯酮均能改善鯉肝臟抗氧化機能。 6.劑量低于500mg/kg的喹賽多和喹烯酮，150mg/kg以下劑量的喹乙醇基本不會引起明顯的病變。500mg/kg喹乙醇對這些組織結構會產生不同程度的病理改變，且隨著飼養(yǎng)時間的延長，組織病變程度加深。長期使用500mg/kg的喹賽多和喹烯酮也會引起輕微的組織病變。 本文研究了喹賽多、喹乙醇和喹烯酮對鯉生長性能、血液生理