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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用自組裝DHL/RADA-16多肽納米纖維支架凝膠與兔髓核細(xì)胞(nucleus pulposus cells,NPCs)聯(lián)合培養(yǎng),觀察其對NPCs的作用。
方法:3周齡健康日本大耳白兔,取其胸腰段椎間盤髓核組織,提取培養(yǎng)髓核細(xì)胞,用甲苯胺藍(lán)和二型膠原免疫組化法鑒定髓核細(xì)胞。等量的細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM-F12觸發(fā)多肽溶液DHL-PA+RADA-16-PA(1:1)使其自組裝成DHL/RADA-16(實(shí)驗(yàn)組),將髓核細(xì)胞
2、與自組裝納米材料復(fù)合培養(yǎng)(實(shí)驗(yàn)組)以及髓核細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)(對照組),觀察自組裝納米材料對髓核細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
結(jié)果:原子力顯微鏡顯示DHL/RADA-16形成了納米級纖維;免疫組化法對髓核細(xì)胞的鑒定:成功分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞,甲苯胺藍(lán)染色(+),二型膠原抗體(+);將DHL/RADA-16(實(shí)驗(yàn)組)納米材料與髓核細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng),Calcein-AM/PI死、活細(xì)胞染色,活細(xì)胞數(shù)達(dá)95%以上,CCK-8間接計數(shù)顯示DHL/RA
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