FN在人絨毛膜癌細(xì)胞的表達(dá)及FUDR對絨癌細(xì)胞抑制的作用研究.pdf

1、目的：
　　 (1)檢測纖維粘連蛋白(fibronectin,FN)在人絨毛膜癌不同侵襲力細(xì)胞JEG-3和JAR內(nèi)的表達(dá),探討FN高表達(dá)與絨毛膜癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系；
　　 (2)研究氟尿嘧啶脫氧核苷(floxuridine,FUDR)對絨毛膜癌高侵襲力JEG-3細(xì)胞生長能力的抑制作用,并與5-氟尿嘧啶進(jìn)行比較,觀察兩種藥物影響JEG-3細(xì)胞生長能力的差異并比較藥物作用后JEG-3細(xì)胞中FN的表達(dá)改變。
　　 方法：

2、
　　 (1)運(yùn)用Matrigel體外侵襲實(shí)驗(yàn)方法,檢測兩種絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3和JAR侵襲能力,并比較差異；
　　 (2)運(yùn)用熒光定量-聚合酶鏈反應(yīng)(real time-polymerase chainreaction,RT-PCR)及蛋白免疫印跡(Western blotting)方法,檢測絨毛膜癌細(xì)胞JEG-3和JAR中FN mRNA和蛋白表達(dá)情況,并比較兩者間的差異；
　　 (3)用不同濃度(0.05、

3、0.25、0.5、2.5和5 ug/ml)氟尿嘧啶脫氧核苷(FUDR)和5-氟尿嘧啶(5-FU),分別處理體外培養(yǎng)的高侵襲性絨毛膜癌細(xì)胞株JEG-3,在處理后48小時(shí),以MTT比色法檢測兩種藥物對JEG-3細(xì)胞生長增殖的影響,計(jì)算相對生存率,比較兩種藥物抑制JEG-3細(xì)胞生長能力的差異并檢測FN蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 (1)Matrigel體外侵襲實(shí)驗(yàn)證實(shí),JEG-3細(xì)胞較JAR細(xì)胞的侵襲能力明顯增強(qiáng)(P＜0.0

4、1):
　　 (2)在兩種細(xì)胞中均檢測到FN mRNA表達(dá),相對低侵襲性JAR細(xì)胞,高侵襲性JEG-3細(xì)胞中FN mRNA表達(dá)明顯增加(P＜0.001),JEG-3細(xì)胞中FN蛋白表達(dá)水平較JAR細(xì)胞亦明顯增加(P＜0.05)；
　　 (3)MTT抑制實(shí)驗(yàn)證實(shí),FUDR和5-FU均對JEG-3細(xì)胞的生長能力具有抑制作用,且呈劑量依賴性。在5、2.5和0.5ug/ml藥物濃度處理下,FUDR對JEG-3細(xì)胞生長抑制能力明顯強(qiáng)