凋亡抑制蛋白Livin在人胃癌細胞和組織中的表達及意義.pdf

1、目的：本研究旨在：(1)通過檢測Livin基因在胃癌細胞系和胃癌組織、癌旁組織和良性胃病胃粘膜組織中的表達，探討Livin在部分胃癌細胞系和胃癌組織中表達是否上調(diào)；(2)通過分析胃癌組織中Livin表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關系，探討Livin檢測輔助判斷胃癌惡性程度和進展情況的可能性；(3)通過檢測胃癌中IAP家族另一成員Survivin基因的表達，探討兩者表達的相關性；(4)設計靶向于Livin的siRNA轉染至人胃癌細胞系，檢測轉染

2、后對該細胞LivinmRNA的抑制情況，從而篩選有效沉默Livin表達的siRNA，并探討siRNA沉默胃癌細胞Livin表達的可行性；(5)SiRNA沉默人胃癌細胞株Livin基因表達后，通過檢測細胞增殖能力及對凋亡刺激劑敏感性，探討Livin在細胞增殖和凋亡抵抗中可能發(fā)揮的作用。 方法：(1)采用逆轉錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)法檢測三株胃癌細胞、胃癌組織、癌旁組織和良性胃病胃粘膜組織中Livin和Survivin的mR

3、NA的表達；(2)用Westernblot法檢測上述細胞系及組織中Livin和Survivin蛋白的表達；(3)設計靶向于Livin的siRNA轉染胃癌細胞SGC-790148h后，RT-PCR檢測轉染前后LivinmRNA的改變；(4)流式細胞儀檢測轉染siRNA前后胃癌細胞SGC-7901對凋亡刺激劑敏感性的改變，MTT法檢測5-FU、順鉑對轉染前后細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)的改變及轉染前后細胞增殖能力的差異。 結論：(

4、1)Livin及Survivin在三株胃癌細胞株和部分胃癌患者中表達，而在另一部分胃癌組織、良性胃病胃粘膜組織、癌旁組織中未見表達，提示其表達與部分胃癌的發(fā)生發(fā)展可能有關，Livin在胃癌中表達上調(diào)的機制，尚需進一步研究；(2)本研究中淋巴結轉移組Livin陽性率高于淋巴結未轉移組，組織分化程度較差組Livin陽性率高于分化程度較高組，提示Livin可能與胃癌惡性程度及病情進展可能有關；(3)Livin與Survivin表達在本研究中未

5、顯示相關性，提示兩者雖然系同一家族，但表達調(diào)控的機制并非完全一致，需進一步探討；(4)體外轉染靶向于Livin的siRNA能夠沉默胃癌SGC-7901細胞Livin的表達，增加SGC-7901細胞對凋亡刺激劑(本研究選用化療藥物)的敏感性，抑制細胞的增殖，其作用的機制及在體內(nèi)情況尚需進一步研究。本研究的初步結果提示Livin在胃癌細胞系及組織中較癌旁、良性胃病胃粘膜組織中表達明顯增高，Livin與胃癌的發(fā)生發(fā)展可能有關，且與胃癌細胞凋亡