Hepassocin調(diào)控細(xì)胞增殖、肝臟發(fā)育及血脂代謝的機(jī)制研究.pdf

1、Hepassocin(HPS)，又稱纖維蛋白原相似蛋白1（FGL1）或肝細(xì)胞來源的纖維蛋白原相關(guān)蛋白1（HFREP-1），它主要表達(dá)于肝臟中，并在肝臟再生過程中表達(dá)上調(diào)。HPS是一種特異性的肝臟生長(zhǎng)因子，通過自分泌機(jī)制刺激原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和正常肝細(xì)胞系增殖，但 HPS誘導(dǎo)細(xì)胞增殖的分子機(jī)制仍不明確。另外，重組人源HPS能夠有效降低急性化學(xué)性肝損傷引起的大鼠死亡，表明HPS在肝臟損傷保護(hù)中發(fā)揮重要作用。HPS基因敲除小鼠呈現(xiàn)全面的糖脂代謝缺

2、陷表型，而且非酒精性脂肪肝?。∟AFLD）患者的血清HPS水平顯著升高，表明HPS的生物學(xué)功能非常復(fù)雜，需要進(jìn)一步的探索。
　　實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果表明HPS通過ERK途徑誘導(dǎo)正常肝細(xì)胞增殖，且在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞來源的細(xì)胞表面存在HPS的特異性受體，但HPS如何通過其受體激活ERK通路并傳遞細(xì)胞增殖效應(yīng)仍然未知。本論文發(fā)現(xiàn)EGFR的反式激活在HPS誘導(dǎo)的ERK活化和肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞系L02細(xì)胞增殖中發(fā)揮重要作用，抑制Src的活性或者敲低內(nèi)源Sr

3、c表達(dá)后可有效抑制HPS刺激下EGFR/ERK通路的活化以及細(xì)胞增殖效應(yīng)。另外，HPS還可以誘導(dǎo) FAK活化并引發(fā)自噬反應(yīng)，從而介導(dǎo)caveolin-1蛋白質(zhì)發(fā)生降解，并導(dǎo)致細(xì)胞G1/S期細(xì)胞周期行進(jìn)。本論文中我們還利用斑馬魚和小鼠模型研究了HPS新的生物學(xué)功能。HPS在斑馬魚和其他物種之間具有高度的進(jìn)化同源性和保守性，而用特異性的Morpholinos敲低HPS的表達(dá)后，斑馬魚肝臟生長(zhǎng)階段的發(fā)育和肝細(xì)胞增殖水平都受到明顯抑制，表明HP

4、S參與了斑馬魚的肝臟發(fā)育。在小鼠模型中我們發(fā)現(xiàn)禁食等代謝刺激下，小鼠體內(nèi)PPAR?活化并上調(diào)HPS的表達(dá)和分泌；小鼠腹腔注射HPS后血漿中甘油三脂含量顯著下調(diào)，進(jìn)一步的機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)HPS可以通過上調(diào)LPL的表達(dá)及活性，促進(jìn)血漿中甘油三脂水解。最后，我們利用酵母雙雜交、噬菌體展示和免疫共沉淀-質(zhì)譜的方法篩選到大量HPS相互作用蛋白，這將為HPS的功能和作用機(jī)制研究提供新的線索。
　　綜上所述，我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示了HPS促細(xì)胞增殖和G