沉默Cathepsin D對DADS抑制MGC803細(xì)胞遷移與侵襲的影響.pdf

1、目的：探討沉默組織蛋白酶D（cathepsin D，Cath-D）對二烯丙基二硫（diallyl disulfide，DADS）抑制人胃癌MGC803細(xì)胞遷移與侵襲的影響，闡明DADS抑制胃癌遷移與侵襲的分子機(jī)制。
　　方法：首先通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將Cath-D siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)人胃癌MGC803細(xì)胞，獲得MGC803的重組細(xì)胞系；用30 mg/L的DADS處理MGC803的重組細(xì)胞系與人胃癌MGC803細(xì)胞；RT-PCR和Wes

2、tern blot檢測DADS處理前后三組細(xì)胞株（Cath-D siRNA干擾組、陰性對照組和空白對照組）中Cath-D的mRNA與蛋白表達(dá)變化；劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)分別檢測DADS處理前后三組細(xì)胞株（Cath-D siRNA干擾組、陰性對照組和空白對照組）的遷移與侵襲能力的變化。結(jié)果：沉默Cath-D后，Cath-D mRNA與蛋白的表達(dá)水平明顯下降(P＜0.05)，劃痕距離明顯增寬(P＜0.05)，穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少(P

3、＜0.05)。DADS作用人胃癌MGC803細(xì)胞24h后，Cath-D mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯下降(P＜0.05)，劃痕距離明顯增寬(P＜0.05)，穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少(P＜0.05)；并且，Cath-D siRNA干擾組加DADS處理后Cath-D mRNA與蛋白的表達(dá)水平下降最為明顯（P＜0.05），劃痕距離最寬（P＜0.05），穿膜細(xì)胞數(shù)最少（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.沉默Cath-D可抑制人胃癌MGC