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文檔簡介
1、【目的】
研究青藤堿對胃癌MGC803細胞增殖的抑制作用并探討其相關機制。
【方法】
1.體外培養(yǎng)MGC803細胞,將其分為五組:對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml),加入藥物后培養(yǎng)細胞24、48、72小時,CCK8法檢測其OD值,并計算出其對細胞的抑制率。
2.體外培養(yǎng)MGC803細胞,將其分為五組:對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml),加入藥
2、物后培養(yǎng)細胞48小時,FCM檢測細胞周期,Western blot檢測p21蛋白表達。
3.體外培養(yǎng)MGC803細胞,將其分為五組:對照組、SIN組(300、600、900、1200ug/ml),加入藥物后培養(yǎng)細胞48小時,FCM檢測細胞凋亡,Western blot檢測線粒體和胞漿 Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型 Caspase-3、Survivn蛋白表達。
【結果】
1.1、青藤堿對胃癌MGC8
3、03細胞的抑制率
SIN組(300、600、900、1200μg/mL)24小時抑制率分別為(2.25±0.45、7.71±1.70、15.42±3.95、35.75±2.61)%,其中SIN組(600、900、1200ug/mL)高于對照組(P<0.05),SIN組(300ug/ml)無明顯差異(P>0.05);SIN組(300、600、900、1200μg/mL)48小時抑制率分別為(10.36±2.82、18.02±1.
4、01、24.36±2.65、40.59±3.18)%,高于對照組(P<0.05);SIN組(300、600、900、1200μg/mL)72小時抑制率分別為(19.57±1.36、26.31±3.34、44.00±3.96、53.25±5.51)%,高于對照組(P<0.05)。
2.1、青藤堿對細胞周期影響
SIN組(300、600、900、1200ug/ml) G1期比率分別為(70.39±0.31、69.22±0
5、.36、83.35±4.02、87.15±2.82)%,高于對照組(61.13±1.22)%(P<0.05);S期比率分別為(20.03±2.22、17.65±1.82、9.87±1.26、9.33±0.82)%,低于對照組(26.46±1.02)%;G2/M期比率分別為(9.57±0.68、8.03±1.06、6.78±1.07、3.52±0.92)%,低于對照組(12.41±1.45)%。
2.2、青藤堿對p21蛋白表達影
6、響
SIN組(300、600、900、1200ug/ml)p21蛋白表達水平分別為(1806±111.70、2610±130.00、2923±150.44、3717±155.03)INT×mm,高于對照組(1573±61.10) INT×mm(P<0.05)
3.1、青藤堿對細胞凋亡影響
SIN組(300、600、900、1200ug/ml)凋亡率分別為(2.49±0.51、4.25±0.67、10.35±
7、1.61、12.82±1.41)%,高于對照組(0.12±0.03)%(P<0.05)。
3.2、青藤堿對線粒體和胞漿Cyt C、Bax、Bcl-2、裂解型Caspase-3、Survivn蛋白及Bax/Bcl-2比值表達影響
SIN組(300、600、900、1200ug/ml)胞漿 Cyt C蛋白表達水平分別為(965±47.69、951±73.67、1600±75.50、2136±65.06)INT× mm,高
8、于對照組(633±67.89) INT×mm(P<0.05);線粒體CytC蛋白表達水平分別為(981±33.49、831±32.70、644±78.14、660±98.49)INT×mm,低于對照組(1623±135.77) INT× mm(P<0.05);
SIN組(300、600、900、1200ug/ml)Bax蛋白表達水平分別為(1314±60.89、1757±70.24、2286±135.0、2557±84.54)
9、INT×mm,高于對照組(794±53.78) INT× mm(P<0.05); Bcl-2蛋白表達水平分別為(2150±105.36、1640±105.35、1009±29.57、714±73.50)INT×mm,其中SIN組(600、900、1200ug/ml)低于對照組(2153±70.50) INT×mm(P<0.05),SIN組(300ug/mL)無明顯差異(P>0.05);Bax/Bcl-2比值分別為(0.62±0.05、1
10、.07±0.09、2.27±0.07、3.58±0.25),高于對照組(0.37±0.03)(P<0.05)
SIN組(300、600、900、1200ug/ml)裂解型Caspase-3蛋白表達水平分別為(2075±155.93、2523±116.76、3605±168.84、4015±132.57)INT×mm,高于對照組(1621±38.50) INT×mm(P<0.05);Survivn蛋白表達水平分別為(2313±1
11、23.42、1857±150.11、1167±150.44、582±151.19)INT×mm,低于對照組(2990±160.93)INT×mm(P<0.05)。
【結論】
1.青藤堿能夠顯著抑制胃癌MGC803細胞增殖。
2.青藤堿抑制胃癌MGC803細胞增殖與其阻滯細胞G1期有關,其阻滯作用與上調p21蛋白表達有關。
3.青藤堿抑制胃癌MGC803細胞增殖與其誘導細胞凋亡有關,其誘導作用與促進
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