大鼠運動性骨關節(jié)損傷模型構(gòu)建及炎性通路相關因子差異表達和干預研究.pdf

1、研究目的：構(gòu)建大鼠運動性骨關節(jié)損傷模型，并在此模型以布洛芬作為陽性對照，觀察運動性骨關節(jié)損傷的可能分子機制及HWTX—Ⅰ的抗傷害效應，為運動性骨關節(jié)損傷發(fā)生和發(fā)展的分子機制提供新的理論和實驗依據(jù)。
　　 研究方法：5—6周齡健康雄性SD大鼠96只，隨機分為早期生理鹽水組(n=16)、早期HWTX—Ⅰ用藥組(n=16)、早期布洛芬用藥組(n=16)、晚期生理鹽水組(n=16)、晚期HWTX—Ⅰ用藥組(n=16)、晚期布洛芬用藥組(

2、n=16)。采用改良Hulth模型結(jié)合間歇性中低強度運動建立大鼠運動骨關節(jié)損傷病理模型，用本課題組建立的大鼠硬脊膜外腔置管手術方法，通過光鏡觀察運動性骨關節(jié)損傷膝關節(jié)軟骨形態(tài)學變化；分光光度法測定血清中SOD、CAT、GS—Px活力及NO含量；RT—PCR法檢測膝關節(jié)軟骨中TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8以及MMP—13mRNA的表達水平。
　　 研究結(jié)果：
　　 (1)HE染色光鏡觀察發(fā)現(xiàn)早期生理鹽水組膝關

3、節(jié)軟骨組織的潮線消失，軟骨細胞排列較為紊亂，大量軟骨細胞固縮；早期布洛芬用藥組膝關節(jié)軟骨組織的潮線不齊，軟骨細胞排列不齊，少量軟骨細胞固縮；早期HWTX—I用藥組膝關節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)較另外兩組更接近正常組織。晚期生理鹽水組膝關節(jié)軟骨表面出現(xiàn)關節(jié)裂隙，潮線消失，軟骨細胞排列較紊亂；晚期布洛芬用藥組膝關節(jié)軟骨組織潮線不齊，軟骨細胞排列不齊，可見軟骨細胞有少量空泡；晚期HWTX—Ⅰ用藥組膝關節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)正常，潮線較整齊，軟骨細胞排列比較一致，

4、有少量軟骨細胞固縮。
　　 (2)分光光度法測定大鼠血清中NO含量及CAT、GSH—Px、SOD活力，血清中CAT、GSH—Px、SOD活力以HWTX—Ⅰ用藥組最高，布洛芬用藥組、生理鹽水組隨之降低；血清中CAT活力以生理鹽水組最低；血清中NO以生理鹽水組最高，布洛芬用藥組、HWTX—Ⅰ用藥組隨之降低。
　　 (3)RT—PCR法檢測滑膜組織和軟骨細胞中TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8、MMP—13 mRNA

5、的表達水平。其結(jié)果均以生理鹽水組最高，布洛芬用藥組次之，HWTX—Ⅰ用藥組最低。布洛芬用藥組、HWTX—Ⅰ用藥組與生理鹽水組之間存在顯著性差異(P<0．01)。
　　 結(jié)論：
　　 (1)我們參照Hulth模型改建了大鼠運動性骨關節(jié)損傷模型，模擬了運動員膝關節(jié)運動性骨關節(jié)損傷狀態(tài)。為HWTX—Ⅰ的抗傷害作用研究提供了實驗動物模型。
　　 (2)形態(tài)學觀察表明HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥，對大鼠運動性骨關節(jié)損傷起到明

6、顯的抗損傷和保護作用，其抗傷害效果要優(yōu)于布洛芬。
　　 (3)HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥可以下調(diào)大鼠血清中NO含量，上調(diào)運動性骨關節(jié)損傷大鼠血清中CAT、GSH—Px、SOD活力，從而通過減輕自由基對運動性骨關節(jié)損傷的影響。
　　 (4)HWTX—Ⅰ硬脊膜外腔用藥可下調(diào)運動性骨關節(jié)損傷軟骨滑膜中炎性細胞因子TNF—α、IL—1β、IL—6、MMP—8、MMP—13 mRNA的表達。其抗炎效果相對于目前臨床使用的鈣通道拮抗