細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過(guò)程中的表達(dá).pdf

1、目的： 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白（matrix extracellular phosphoglycoprotein，MEPE）是小型N端連接整合糖蛋白（small integrin—binding ligand N—linked glycoprotein，SIBLING）家族成員。該家族成員還包括：骨橋蛋白，骨唾液蛋白，牙基質(zhì)蛋白1，牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白和釉蛋白。SIBLING家族蛋白在基質(zhì)鈣化、調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞功能方面發(fā)揮重要

2、作用。MEPE是一種磷調(diào)節(jié)因子，對(duì)磷酸鹽代謝紊亂及各種骨組織疾病的成骨細(xì)胞增生及牙周組織生理連接的重建過(guò)程中有重要作用。 本研究擬通過(guò)觀(guān)察小鼠出生后牙齒連續(xù)發(fā)育過(guò)程中MEPE在牙胚和牙周組織中的表達(dá)變化，研究MEPE在小鼠牙齒硬組織及牙周組織形成等方面可能發(fā)揮的作用，為進(jìn)一步研究牙齒發(fā)育的分子機(jī)制和牙周組織的再生提供理相應(yīng)的理論依據(jù)。通過(guò)觀(guān)察MEPE在牙周組織缺損愈合過(guò)程中的組織分布，探討MEPE在牙周組織再生中的作用，為臨床上

3、利用MEPE治療牙周炎及牙槽骨萎縮、頜骨畸形及頜骨骨折等提供理論依據(jù)。 方法： 不同發(fā)育期SPF級(jí)BALB/c小鼠（山東大學(xué)動(dòng)物中心提供）88只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉，新鮮配制4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘，分離雙側(cè)下頜骨，4℃下再固定24h，10%EDTA脫鈣30—60天，梯度乙醇脫水、石蠟包埋，近遠(yuǎn)中向5μm連續(xù)切片。 成年SPF級(jí)Wistar大鼠（山東大學(xué)動(dòng)物中心提供）24只。戊巴比妥鈉腹腔麻醉后行右側(cè)磨牙區(qū)

4、牙槽骨開(kāi)窗手術(shù)（5mm×2mm×1mm），分別于術(shù)后14天和28天戊巴比妥鈉腹腔麻醉，新鮮配置4%多聚甲醛循環(huán)內(nèi)固定30分鐘，分離右側(cè)下頜骨，4℃下再固定24h、10% EDTA脫鈣90天，梯度乙醇脫水、石蠟包埋，近遠(yuǎn)中向5μm連續(xù)切片。 HE染色觀(guān)察牙周組織缺損愈合情況。 PV免疫組化兩步法檢測(cè)MEPE在牙齒發(fā)育及牙周組織缺損愈合過(guò)程中各組織的表達(dá)。 結(jié)果： 1.MEPE在出生后小鼠牙齒發(fā)育過(guò)程中的

5、表達(dá)：牙胚發(fā)育早期，MEPE在成釉細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓組織中均有表達(dá)。隨著牙胚的不斷發(fā)育，MEPE在上述細(xì)胞中的表達(dá)逐步減弱：在牙周膜中逐漸表達(dá)；在前期牙本質(zhì)中亦有表達(dá)；在成年小鼠牙周膜中弱陽(yáng)性表達(dá)。MEPE在嵌入骨陷窩的成熟成骨細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)。 2.術(shù)后14天，術(shù)區(qū)有部分新生牙槽骨形成，部分牙周纖維附著于根面牙本質(zhì)上。術(shù)后28天，術(shù)區(qū)完全被新生牙槽骨覆蓋，在新生牙槽骨和牙本質(zhì)之間可見(jiàn)牙周膜和部分牙骨質(zhì)生成，牙周膜大部分附