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文檔簡介
1、目的:(1)分析ECM1mRNA和蛋白在不同轉移潛能人肝癌細胞株、肝癌組織、癌旁組織中的表達水平,探討ECM1與侵襲轉移間的關系。(2)檢測肝癌組織中ECM1的表達及肝癌患者術前血清中ECM1的濃度,分析ECM1表達水平與肝癌臨床病理特征及生存預后間的相關性,探討ECM1在肝癌轉移和術后復發(fā)過程中的作用,及其促進肝癌侵襲轉移可能的分子機制,對肝癌的預后判斷進行評估。
方法:(1)通過運用RT-PCR、Western Blot方
2、法,檢測肝癌和癌旁組織及具有相似遺傳背景、不同轉移潛能的人肝癌細胞株中ECM1的表達水平,分別從mRNA及蛋白水平比較其表達水平與肝癌侵襲轉移間的關系。(2)采用ELISA方法檢測肝癌患者術前血清中ECM1的濃度,分析ECM1的表達與肝癌臨床病理特征及術后生存預后的關系。(3)通過免疫組織化學染色檢測肝癌患者組織中ECM1和MMP-9的表達,探討兩者間的關系,及與肝癌臨床病理特征及生存預后間的關系。
結果:(1)不同轉移潛能的
3、人肝癌細胞株中ECM1表達量存在明顯差異,隨著細胞株轉移潛能的逐步增加ECM1表達量呈升高趨勢:MHCC97-L 4、QR137.83pg/ml-267.27pg/ml),明顯高于正常對照組的108.06pg/ml(IQR88.26pg/ml-126.74pg/ml),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.001),并且發(fā)現(xiàn)血清ECM1濃度與腫瘤大小(P=0.001)、結節(jié)數(shù)(P=0.028)、血管侵犯(P<0.001)和TNM分級有關(P<0.001),而與其他因素無明顯相關性。采用Cox多因素風險分析表明,肝癌患者術前血清中ECM1高濃度(>180pg/ml 5、)是肝癌患者總生存率和無瘤生存率的獨立影響因子。(3)免疫組織化學染色結果顯示:ECM1和MMP-9均主要表達于細胞胞漿中,在所檢測的標本中,ECM1和MMP-9在肝癌組織中的表達陽性率分別為73.3%(88/120)和65.0%(78/120),明顯高于正常肝組織中的23.5%和11.8%。ECM1和MMP-9在肝癌組織中的表達與腫瘤血管侵犯及TNM分級相關,而且MMP-9還與腫瘤的大小、結節(jié)數(shù)、分化程度和肝硬化程度有關(P<0.05 6、),而兩者均與患者性別、年齡、血清AFP水平、HBsAg狀態(tài)、child-pugh分級、包膜情況、分化程度等無明顯相關性(P>0.05)。ECM1和MMP-9均陽性表達患者的總生存率和無瘤生存率明顯低于有一項陽性或全陰性表達患者。Cox多因素風險分析表明ECM1和MMP-9的表達是肝癌患者總生存率及無瘤生存率的獨立預測因子。ECM1與MMP-9在肝癌中的表達具有顯著正相關(r=0.585,P<0.001)。
結論:ECM1的表
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