孤雄單倍體胚胎發(fā)育過程中X染色體狀態(tài)研究.pdf

1、單倍體胚胎干細(xì)胞，作為新興的重要的基因編輯技術(shù)工具，被人們廣泛應(yīng)用于基因修飾領(lǐng)域以及藥物篩選領(lǐng)域，利用單倍體胚胎干細(xì)胞自動二倍化的特點(diǎn)，可以使人們更加容易獲得某些隱性基因的純合子，另外，也可以利用基因捕獲或增強(qiáng)子捕獲等技術(shù)尋找新的基因以及增強(qiáng)子。在小鼠上，孤雄單倍體干細(xì)胞作為一種新的獲得胚胎干細(xì)胞的方式，成為了最近的受到大家廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)，然而，由于孤雄單倍體胚胎發(fā)育率低以及胚胎質(zhì)量差所導(dǎo)致其建系效率低的問題成為了限制孤雄單倍體胚胎干細(xì)

2、胞獲得廣泛應(yīng)用的熏要因素之一。
　　為改善孤雄單倍體胚胎發(fā)育情況，我們檢測了孤雄單倍體胚胎的體外發(fā)育過程以及Xist基因表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)孤雄單倍體胚胎囊胚發(fā)育率只有10～14％，發(fā)育至囊胚所需時程從3.3天到3.5天不等。RNA-FISH跟蹤Xist表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)主要存在三種表達(dá)模式，Xist陰性胚胎、Xist鑲嵌型胚胎和Xist陽性胚胎。Xist在多數(shù)早期胚胎中主要呈現(xiàn)表達(dá)狀態(tài)，在發(fā)育至囊胚階段的多數(shù)胚胎中主要呈現(xiàn)抑制的趨勢，