兔VX2乳腺癌抗血管生成治療與新輔助化療f-MSCT評(píng)價(jià)的研究.pdf

1、目的：
　　 建立兔VX2乳腺癌動(dòng)物模型,獲得f-MSCT評(píng)價(jià)未經(jīng)治療的兔VX2乳腺癌血管生成特點(diǎn),為本研究的接續(xù)實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)和基礎(chǔ);應(yīng)用免疫組化和Western blot兩種方法評(píng)價(jià)兔VX2乳腺癌動(dòng)物模型恩度、新輔助化療及兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成效果,初步探討恩度、新輔助化療和兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成治療的原因;用f-MSCT評(píng)價(jià)恩度、新輔助化療和兩種方案聯(lián)合治療的抗血管生成治療效果,尋找評(píng)估恩度、新輔助化療和兩種方案

2、聯(lián)合治療的抗血管生成治療療效的方法。
　　 方法：
　　 用VX2瘤株制備瘤細(xì)胞懸液注射在2只新西蘭大白兔后肢股內(nèi)側(cè)區(qū)肌肉內(nèi)制成傳代兔,2周時(shí)于注射部位手術(shù)摘取已經(jīng)形成的實(shí)性腫瘤,切取腫瘤邊緣生長(zhǎng)旺盛魚(yú)肉樣組織,剪成直徑0.5mm～1mm制成組織塊懸液。麻醉狀態(tài)下將組織塊懸液接種到94只純種雌性新西蘭白兔(月齡3～4個(gè)月;體重2.0～2.5 kg)乳腺區(qū),種瘤后2周隨機(jī)選取16只瘤兔進(jìn)行論文第一部分實(shí)驗(yàn)研究:應(yīng)用GE l

3、ightspeed16 CT灌注掃描,利用Perfusion3軟件中的去卷積模型來(lái)計(jì)算四種灌注參數(shù)的灌注值即血流量(BF)、血容積(BV)、平均通過(guò)時(shí)間(MTT)和表面通透性(PS);之后16只荷瘤兔取瘤組織進(jìn)行免疫組化檢測(cè)MVD和VEGF表達(dá)。將剩余的78只荷瘤兔隨機(jī)分四組用于論文第二、三部分實(shí)驗(yàn)研究:設(shè)對(duì)照組為生理鹽水組18只給予生理鹽水治療,恩度組20只給予單純恩度治療:新輔助化療組20只給予CEF(CTX,EPI,5-Fu)方案

4、治療:聯(lián)合治療組20只行恩度加新輔助化療兩種方案聯(lián)合治療。論文第二部分于各組治療后CT灌注成像之后所有荷瘤兔手術(shù)取瘤組織,用免疫組化法檢測(cè)MVD和VEGF,用Westernblot法檢測(cè)VEGF的蛋白表達(dá)。論文第三部分各組荷瘤兔治療前和治療兩周后分別行CT灌注成像檢測(cè)BF、BV、MTT和PS。應(yīng)用SPSS13.0軟件包采用t檢驗(yàn)、方差分析、析因分析及相關(guān)分析等方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P＜0.05水平為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：

5、r>　　 1、論文第一部分16只兔種瘤2周后成瘤率達(dá)100％。兔VX2乳腺癌模型腫瘤CT灌注參數(shù).BF、BV和PS均值明顯高于肌肉組織,而MTT低于肌肉組織;兩組間的BF、BV、MTT及PS具有顯著性差異(P＜0.01);其免疫組化檢測(cè)MVD平均值為283.45±8.04;VEGF表達(dá)為7.33±0.27;本組實(shí)驗(yàn)中兔VX2乳腺癌組織的CT灌注參數(shù)BF、BV和PS與MVD和VEGF表達(dá)間呈正相關(guān),而MTT與MVD和VEGF表達(dá)之間呈負(fù)

6、相關(guān)。
　　 2、論文第二部分本部分免疫組化檢測(cè)MVD和VEGF表達(dá)結(jié)果:新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組和生理鹽水組的MVD和VEGF兩兩比較均有顯著性差異(P＜0.01),表現(xiàn)為聯(lián)合治療組均值最低,恩度組居中,新輔助化療組較高,生理鹽水組最高,表明生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組MVD和VEGF有依次遞減的趨勢(shì)。析因分析發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療組的作用最強(qiáng),表明恩度和新輔助化療藥聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用;Western blot

7、檢測(cè)結(jié)果:生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組VEGF蛋白表達(dá)的灰度值依次減低。
　　 3、論文第三部分生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組及聯(lián)合治療組治療后CT。灌注獲得的參數(shù)BF、BV、PS均值較治療前明顯減低,而MTT均值較治療前增大,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);方差分析和q檢驗(yàn)進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果表明新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組和生理鹽水組的BF、BV、MTT及PS兩兩比較均有顯著性差異(P＜0.01),表現(xiàn)

8、為聯(lián)合治療組BF、BV和PS均值最低,MTT均值最高;恩度組BF、BV和PS均值高于聯(lián)合治療組,MTT均值低于聯(lián)合治療組;而新輔助化療組BF、BV和PS均值高于恩度組,MTT均值低于恩度組;以上三組BF、BV和PS均值均低于生理鹽水組,MTT高于生理鹽水組。表明生理鹽水組、新輔助化療組、恩度組、聯(lián)合治療組的BF、BV和PS均值依次遞減,而MTT均值依次增高。各組治療后的灌注參數(shù)BF、BV、PS均值與其治療后MVD和VEGF表達(dá)的均值呈正

9、相關(guān),而MTT均值與治療后MVD和VEGF表達(dá)的均值呈負(fù)相關(guān)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1、兔VX2乳腺癌動(dòng)物模型可以作為CT灌注評(píng)價(jià)腫瘤血管生成的實(shí)驗(yàn)研究,f-MSCT可以評(píng)價(jià)未經(jīng)治療的兔VX2乳腺癌腫瘤血管生成。
　　 2、恩度單藥治療兔VX2乳腺癌,可使腫瘤內(nèi)MVD和VEGF表達(dá)顯著減低,發(fā)揮抗血管生成作用;恩度與CEF新輔助化療方案聯(lián)合應(yīng)用治療兔VX2乳腺癌產(chǎn)生了抗血管生成的協(xié)同作用;CEF新