“類風(fēng)關(guān)巴布劑”穴位貼敷對(duì)CIA大鼠滑膜細(xì)胞P53、Bcl-2、NF-κB及其分泌的IL-1β、TNF-α的影響.pdf

1、目的： 1.觀察“類風(fēng)關(guān)巴布劑”治療CIA大鼠時(shí)的發(fā)病情況、病情變化和療效。 2.觀察“類風(fēng)關(guān)巴布劑”對(duì)局部穴位組、遠(yuǎn)道穴位組和系統(tǒng)穴位組療效差異。 3.觀察“類風(fēng)關(guān)巴布劑”治療CIA大鼠對(duì)滑膜細(xì)胞凋亡和炎癥因子的影響。 方法： 1.CIA大鼠的造模：隨機(jī)從100只大鼠中選出10只為正常對(duì)照，其余90只用于造模，參照文獻(xiàn)[1]方法配制成Ⅱ型膠原乳劑。具體方法為：在無(wú)菌條件下，用0.1mol/L冰醋

2、酸充分溶解牛Ⅱ型膠原(BcⅡ)，濃度為4mg/ml，置4℃冰箱過(guò)夜后，與弗氏完全佐劑等體積混合、振蕩乳化，制成BcⅡ乳劑(即每0.5ml含1mgBcⅡ)。置4℃冰箱保存?zhèn)溆?。注射方法：于大鼠背部及尾根?點(diǎn)行皮內(nèi)注射，每點(diǎn)0.1ml，總量0.5ml(含1mgBcⅡ型膠原)。15d后同法分兩點(diǎn)皮內(nèi)激發(fā)注射。正常對(duì)照組予以生理鹽水同法注射。初次免疫25d后參照關(guān)節(jié)炎指數(shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[2]對(duì)造模效果進(jìn)行評(píng)估。 2.CIA大鼠分組給藥：將模

3、型復(fù)制成功的大鼠隨機(jī)分為四組，每組10只，分別作為CIA模型組、局部穴位貼敷組(局部組)、類風(fēng)關(guān)巴布劑遠(yuǎn)道穴位貼敷組(遠(yuǎn)道組)及類風(fēng)關(guān)巴布劑綜合穴位貼敷組(系統(tǒng)組)正常對(duì)照組、CIA模型組不予任何處理，局部組予以左側(cè)足三里、犢鼻、委中穴位貼敷、遠(yuǎn)道組予以雙側(cè)腎俞穴位貼敷，綜合組予雙側(cè)腎俞、雙側(cè)足三里穴位貼敷，三組給藥劑量相同(給藥面積與時(shí)間相同)。每1d用藥1次，連續(xù)14天。 3.觀察關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)，細(xì)胞因子的檢測(cè)，滑膜組織P53

4、、Bcl-2、NF-κB的ABC染色。 結(jié)果： 1.關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)觀察[4]’給藥第2周時(shí)，各組指數(shù)低于模型組，其中系統(tǒng)組、局部組與模型組有顯著性差異。(P＜0.05)。給藥第3周時(shí)，各組指數(shù)低于模型組，與模型組均有顯著性差異(P＜0.05)。 2.關(guān)節(jié)滑膜組織溶漿[6]IL-1β、TNF-α定給藥組與模型組相比，TNF-α水平均降低，有顯著性差異(P＜0.01)。系統(tǒng)組、局部組、遠(yuǎn)道組與模型組相比，IL-1β水平

5、有顯著性差異(P＜0.01)。 3.P53、bcl-2、NF-κB計(jì)分[7]比較：在表4中，與模型組比較，各治療組的P53、bcl-2、NF-κB積分差異均有顯著性，P53和bcl-2積分增加，說(shuō)明治療后滑膜細(xì)胞凋亡增加，而系統(tǒng)組接近正常組(P＞0.05)；NF-κB積分降低，說(shuō)明炎癥改善，此項(xiàng)指標(biāo)也是系統(tǒng)組接近正常。 結(jié)論： 1.“類風(fēng)關(guān)巴布劑”穴位貼敷能夠有效控制CIA大鼠關(guān)節(jié)炎的病情并誘導(dǎo)滑膜細(xì)胞凋亡。