GLUT-1對(duì)骨肉瘤的影響及其相關(guān)因素的調(diào)控研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1在不同骨腫瘤中的表達(dá)
　　 目的：研究葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1（GLUT-1）在正常骨組織及不同骨腫瘤標(biāo)本中的表達(dá)情況并為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。
　　 材料和方法：收集我院臨床骨肉瘤標(biāo)本30例，骨巨細(xì)胞瘤標(biāo)本15例，骨樣骨瘤標(biāo)本10例及正常骨組織標(biāo)本10例，采用免疫組化染色檢測(cè)各腫瘤組織中的GLUT-1的分布與表達(dá)情況。通過體外培養(yǎng)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63、臨床骨肉瘤細(xì)

2、胞、臨床骨巨細(xì)胞瘤細(xì)胞及成骨細(xì)胞，運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)各腫瘤組中GLUT-1基因的表達(dá)并分析各組表達(dá)情況有何不同及其之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：免疫組化顯示，骨肉瘤標(biāo)本GLUT-1染色多為強(qiáng)陽性，強(qiáng)陽性占總例數(shù)的53%；骨巨細(xì)胞瘤切片GLUT-1染色多為陽性，陽性占總例數(shù)的60%；骨樣骨瘤標(biāo)本多為陰性，陰性占總例數(shù)的80%；正常骨組織中未見GLUT-1陽性表達(dá)。經(jīng)分析骨肉瘤組中的GLUT-1的表達(dá)率明顯高于與其余3組標(biāo)本（χ2

3、=1.622，P=0.009；χ2=34.667，P<0.001，χ2=40.000，P<0.001）。通過RT-PCR顯示，GLUT-1基因表達(dá)廣泛存在于骨肉瘤系的MG-63細(xì)胞、臨床骨肉瘤細(xì)胞以及骨巨細(xì)胞瘤中，而正常成骨細(xì)胞內(nèi)并未發(fā)現(xiàn)GLUT-1表達(dá)。
　　 結(jié)論：在骨腫瘤中均可發(fā)現(xiàn)GLUT-1的表達(dá)，且GLUT-1的表達(dá)程度多與骨腫瘤的惡性程度存在著較密切的關(guān)系。在未來的惡性骨腫瘤治療中通過檢測(cè)GLUT-1的表達(dá)率可能可做

4、為判斷骨腫瘤惡性程度參考指標(biāo)及骨腫瘤治療的新的研究與治療方向。
　　 第二部分、TNF-α對(duì)GLUT-1在骨肉瘤細(xì)胞中的調(diào)控研究
　　 目的：研究腫瘤壞死因子（TNF-α）在骨肉瘤中對(duì)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1（GLUT-1）的表達(dá)調(diào)控，及其相互表達(dá)與調(diào)控的關(guān)系。
　　 材料和方法：收集我院臨床骨肉瘤標(biāo)本30例，采用免疫組化染色檢測(cè)TNF-α和GLUT-1的分布情況并對(duì)TNF-α對(duì)GLUT-1表達(dá)影響進(jìn)行研究與對(duì)比。體外

5、培養(yǎng)骨肉瘤細(xì)胞系MG-63及SaOS-2并通過TNF-α進(jìn)行干預(yù)，RT-PCR檢測(cè)2組細(xì)胞的GLUT-1基因表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：免疫組化顯示，骨肉瘤切片中GLUT-1陽性細(xì)胞率分別為84%，TNF陽性細(xì)胞表達(dá)率為70%。在TNF高表達(dá)的骨肉瘤切片中GLUT-1的陽性率為90%。而在沒有TNF高表達(dá)的骨肉瘤切片中GLUT-1的陽性率為60%。RT-PCR顯示：在加入TNF定向誘導(dǎo)的骨肉瘤細(xì)胞系MG-63及SaOS-2中GLUT