不同濃度泌乳素對葡萄膜炎患者外周血淋巴細胞增殖及活化的影響.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文不同濃度泌乳素對葡萄膜炎患者外周血淋巴細胞增殖及活化的影響姓名：蔣莉申請學位級別：碩士專業(yè)：眼科學指導教師：陳蕾2001.4.111例，3個月內(nèi)未使用免疫抑制劑，所有病例均為急性期。病程最短一周，最長20余年。研究對象詳細資料見表1。46例正常對照，男28例，女18例，年齡在21一55歲，無眼部疾病及免疫內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。其中進行活化和增殖檢測6例，男女各3例。實驗方法1.血清泌乳素水平測定所有患者及正常對照者抽取

2、肘靜脈血2毫升，1500轉(zhuǎn)離心獲取血清，于一20℃保存待測。用化學發(fā)光法測定血清泌乳素水平。2.PBMC的分離及培養(yǎng)無菌操作采肘靜脈血10毫升，利用標準的密度梯度離心法分離獲取單個核細胞，胎盼藍染色計數(shù)細胞后將PBMC以3x105孔種于96孔細胞培養(yǎng)板上，每孔加人200微升含10%FBS的RPM11640培養(yǎng)液。加人不同濃度的PRL12.5502001000n歲rnl同時加人SAg(150Wml)，培養(yǎng)108小時。以只加培養(yǎng)液或PHA(

3、5Rgml)或SAg的孔作為對照。3.SAg適宜濃度測定隨機取4例患者試以SAg濃度分別為501001502002501歲mlSAg以150N.grnl為最適濃度。4.sHTdR摻人實驗檢測細胞增殖PBMC經(jīng)過SAg刺激96小時后，每孔加人0.5兩isHTdR12小時后收集細胞，加人5毫升閃爍液中，液閃儀測量1分鐘，以每分鐘脈沖數(shù)作為細胞增殖活性，此實驗每種條件設3孔細胞平行比較取均值。5.雙標記免疫熒光染色流式檢測淋巴細胞表面抗原將培