雞矢藤環(huán)烯醚萜苷對尿酸性腎病大鼠的保護作用及機制研究.pdf

1、尿酸性腎病(Uric acid Nephropathy,UAN)又稱痛風(fēng)性腎病，是由于血尿酸濃度過高，尿酸鹽在腎臟沉積、結(jié)晶導(dǎo)致的腎臟損傷。本課題采用的雞矢藤環(huán)烯醚萜苷(Iridiod Glycosides from Paederia Scandens，IGPS)是從雞矢藤中提取的一類有效成分，其主要活性成份為雞矢藤苷、雞矢藤次苷、車葉草苷。我們的前期研究結(jié)果顯示，雞矢藤提取物對實驗性高尿酸血癥及痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎均有明確的保護作用。本課題進

2、一步研究了IGPS對尿酸性腎病大鼠的影響及其可能的作用機制。主要實驗結(jié)果如下：
　　 1 IGPS對尿酸性腎病大鼠的保護作用采用灌胃給予促尿酸生成劑腺嘌呤（100 mg/kg，ig，qd×28d）和腹腔注射尿酸氧化酶抑制劑氧嗪酸鉀(250 mg/kg，ip，qw)聯(lián)合應(yīng)用的方法制備大鼠尿酸性腎病模型。實驗過程中每天觀察各組大鼠的毛色、神態(tài)、攝食量、進水量、尿量和行為活動度等一般情況；造模0d、7d、14d和28d監(jiān)測大鼠的體重變

3、化情況；造模第5d起每天上午灌胃造模的同時，下午IGPS各劑量組(280、140、70 mg/kg)、別嘌呤醇（50mg/kg）及苯溴馬?。?0mg/kg）灌胃給藥，每天一次，直至造模結(jié)束。造模28d后檢測各組大鼠血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)；計算腎指數(shù)；取腎臟，常規(guī)HE染色，采用光學(xué)顯微鏡觀察腎臟的病理變化。
　　 結(jié)果顯示，IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可明顯改善尿酸性腎

4、病大鼠的一般癥狀，可不同程度的增加尿酸性腎病大鼠的體重，降低血尿酸含量，改善腎功能，降低腎指數(shù)。腎臟光鏡的病理結(jié)果顯示，IGPS (280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可減少腎組織內(nèi)尿酸鹽沉積，減輕腎臟組織的炎性細(xì)胞浸潤及纖維化程度。提示IGPS對腺嘌呤和氧嗪酸鉀所致尿酸性腎病大鼠有較好的保護作用。
　　 2 IGPS對尿酸性腎病大鼠的保護作用機制2.1 IGPS對尿酸性腎病大鼠黃嘌呤氧化酶活性的影響采用酶比色

5、法測定上述尿酸性腎病大鼠的血清及肝臟組織黃嘌呤氧化酶(XO)的活性。結(jié)果顯示，IGPS (280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著抑制尿酸性腎病大鼠的血清及肝臟XO的活性。提示IGPS降尿酸作用可能與抑制尿酸性腎病大鼠血清及肝臟XO的活性有關(guān)。
　　 2.2 IGPS對尿酸性腎病大鼠尿酸代謝的影響采用磷鎢酸法測定各組大鼠尿液尿酸、尿肌酐；測定各組大鼠尿液容積，并計算各組大鼠尿酸分級排泄率。結(jié)果顯示，IGPS(

6、280 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著提高尿酸性腎病大鼠的尿液尿酸水平，IGPS(280、140 mg/kg，ig，qd×24d)可促進尿酸性腎病大鼠的尿酸分級排泄。IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)對尿酸性腎病大鼠的尿肌酐及尿液容積無明顯影響。提示IGPS降血尿酸的作用可能與促進尿酸性腎病大鼠的尿酸分級排泄有關(guān)。
　　 2.3 IGPS對尿酸性腎病大鼠腎臟組織炎癥因子的影響采用免疫組化法檢

7、測上述尿酸性腎病大鼠腎臟組織核因子-κB(NF-κBp65)及單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)蛋白的表達；采用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測MCP-1 mRNA的表達。結(jié)果顯示，IGPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可顯著降低尿酸性腎病大鼠腎臟組織NF-κBp65及MCP-1蛋白的表達，抑制NF-κB向核內(nèi)轉(zhuǎn)移，下調(diào)MCP-1 mRNA的表達。表明IGPS可有效保護炎癥因子介導(dǎo)的腎小管間質(zhì)的損傷，

8、這可能是它發(fā)揮對腎臟保護作用的重要機制。
　　 2.4 IGPS對尿酸性腎病大鼠腎臟組織纖維化的影響采用免疫組化法檢測上述尿酸性腎病大鼠腎皮質(zhì)α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）的表達；采用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)法檢測α-SMAmRNA的表達。結(jié)果顯示，GPS(280、140、70 mg/kg，ig，qd×24d)可抑制尿酸性腎病大鼠腎小管間質(zhì)α-SMA蛋白的表達，下調(diào)α-SMAmRNA的表達。提示IGPS對尿酸性腎病大鼠腎臟纖維化