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文檔簡介
1、目的：研究金櫻子總黃酮(Rosa laevigata Michx total flavonoids, RLMTF)對過氧化氫損傷人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vascular endothelial cells, HUVEC)的保護作用。
方法：
1.用不同濃度(200，400，600，800，1000μmol/L)的H2O2誘導HUVEC損傷構(gòu)建HUVEC氧化損傷模型，用倒置顯微鏡觀察HUVEC
2、的形態(tài)學變化，經(jīng)Hoechst33258染色后熒光顯微鏡下觀察各H2O2處理組細胞細胞核的形態(tài)學變化，采用MTT法測定各組細胞活力；
2.用鄰苯三酚自氧化法測定金櫻子總黃酮對超氧陰離子自由基的清除作用；采用水楊酸法測定金櫻子總黃酮對羥自由基的清除作用；
3.將細胞隨機分為六組：①正常組，② H2O2損傷組，③ Vc陽性對照組，④0.12mg/mL金櫻子總黃酮保護組，⑤0.24mg/mL金櫻子總黃酮保護組，⑥0.48m
3、g/mL金櫻子總黃酮保護組，用試劑盒測定各組細胞培養(yǎng)液中超氧化物歧化酶(SOD)，過氧化氫酶(CAT)，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力；采用Western-Blot法測定各組細胞凋亡抑制蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Bax的表達情況。
結(jié)果：
1.與正常組細胞相比，600，800，1000μmol/L的H2O2處理組細胞活力顯著下降(P＜0.01)，而200μmol/L，400μmol/L H2O2處理組無顯著變
4、化；
2.在20-200μg范圍內(nèi)，隨著待測樣品的加入量增大，金櫻子總黃酮和Vc對羥自由基(·OH)的清除率逐漸增大，對超氧陰離子(O2-·)的清除率則是先增大后減少；蘆丁對·OH的清除率先增大后減小，而對O2-·的清除率逐漸減少；
3.①與H2O2損傷組比較，不同濃度金櫻子總黃酮處理組的細胞活力均顯著升高(P＜0.01)；②與H2O2損傷組比較，0.12mg/mL金櫻子總黃酮處理組細胞培養(yǎng)液中SOD活性無顯著升高，
5、0.12mg/mL，0.48mg/mL金櫻子總黃酮處理組細胞培養(yǎng)液中的SOD活性均顯著升高(P＜0.01)；不同濃度金櫻子總黃酮處理組細胞培養(yǎng)液中的CAT活性均顯著升高(P<0.05或 P<0.01)；不同濃度金櫻子總黃酮處理組細胞培養(yǎng)液中的GSH-Px活性均顯著升高(P<0.01)；③與H2O2損傷組比較，0.12mg/mL金櫻子總黃酮處理組Bcl-2蛋白表達無顯著升高，0.24mg/mL和0.48mg/mL金櫻子總黃酮處理組Bcl-
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