IL-2Rα基因負(fù)調(diào)控元件（NRE）相關(guān)結(jié)合蛋白的篩選克隆及其功能的初探.pdf

1、白細(xì)胞介素2(IL-2)與高親和力白細(xì)胞介素2受體(IL-2R)的相互作用在免疫系統(tǒng)發(fā)育和調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞免疫中起著關(guān)鍵作用。白細(xì)胞介素2受體(IL-2R)由α、β、γ鏈(也稱為p55，p70和p64)所組成，依據(jù)對(duì)IL-2親和力的不同，IL-2R可分成三種形式：低親和力受體只有α鏈；中等親和力受體含有β和γ鏈；高親和力受體含有α、β和γ鏈。因此，α鏈基因特異性的誘導(dǎo)表達(dá)產(chǎn)生高親和力IL-2R，調(diào)控淋巴細(xì)胞增殖并獲得對(duì)生理濃度IL-2的完全

2、反應(yīng)能力。為探討ITF2B對(duì)HIV基因3’LTR序列中NRE活性驅(qū)動(dòng)的的影響，首先構(gòu)建了報(bào)告基因質(zhì)粒pREP4m-HIV LTR-CAT，然后將不同量的ITF2B真核表達(dá)質(zhì)粒分別與裸露模板上的HIV LTR報(bào)告基因質(zhì)粒pC15-CAT和外染色體模板上的HIV LTR報(bào)告基因質(zhì)粒pREP4m-HIV LTR-CAT共轉(zhuǎn)染Jurka細(xì)胞，用RT-PCR的方法分析相對(duì)啟動(dòng)子活性，結(jié)果表明對(duì)染色質(zhì)模板中的HIV基因3’LTR序列中NRE抑制作用

3、加強(qiáng)。 分析上述結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ITF2B蛋白的過(guò)表達(dá)對(duì)IL-2R α基因啟動(dòng)子及HIV基因3’LTR活性的作用與啟動(dòng)子中NRE有關(guān)。對(duì)含有NRE的IL-2R α基因啟動(dòng)子(4k及1.6k)活性起抑制作用；當(dāng)NRE元件缺失時(shí)(0.3k)，該抑制作用消失；ITF2B蛋白對(duì)含有NRE的HIV基因3’LTR也具有抑制作用。因此，本研究首次發(fā)現(xiàn)，IL-2R α基因啟動(dòng)子中的NRE的負(fù)調(diào)控活性與我們應(yīng)用酵母單雜交體系從HTLV-1活化的人外周血