microRNA-21-5p過表達對大鼠高氧性急性肺損傷的影響.pdf

1、目的:探討microRNA(miRNA)-21-5p對大鼠高氧性急性肺損傷的影響,為高氧性急性肺損傷的基因治療提供理論依據(jù)。
　　方法:SD大鼠160只,隨機分為四組,每組40只(n=40),即對照組、磷酸鹽緩沖液(PBS)組、空病毒組以及miRNA-21-5p組。將以上四組大鼠置于自制高氧箱中飼養(yǎng),各組分別在高氧0h、24h、48h以及72h,每組隨機抽取10只大鼠腹腔麻醉后留取動脈血1ml行血氣分析,計算氧合指數(shù)(OI)和呼吸

2、指數(shù)(RI);大體觀察肺組織變化;取大鼠右肺行HE染色,光鏡觀察大鼠肺病理變化并進行病理評分;取大鼠左肺測量大鼠肺濕/干(W/D)重比。
　　結(jié)果:(1)呼吸功能的變化:組內(nèi)比較,隨著時間的延長,對照組、PBS組、空病毒組大鼠OI逐漸減小、RI逐漸增大(P<0.05);組間比較:在高氧損傷24h、48h以及72h,miRNA-21-5p組OI均大于其他三組,而RI均小于其他三組(P<0.05)。(2)肺組織肉眼變化:高氧損傷0h,

3、各組大鼠肺組織柔軟,略呈粉紅色;高氧損傷24h后,肺組織呈淡紅色,表面散在出現(xiàn)大小不等的出血點,肺組織腫脹;高氧損傷48h和72h后肺組織明顯充血水腫,呈暗紅色,肺表面多處可見出血點或斑片狀出血,肺組織腫脹明顯,部分大鼠出現(xiàn)淡黃色或紅色胸腔積液,但 miRNA-21-5p組較其他三組變化明顯輕。(3)大鼠肺組織光鏡下改變:高氧損傷0h,各組大鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰;高氧損傷24h,各組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)中肺泡間隔稍有增寬、水腫和少量炎性細胞浸潤;高

4、氧損傷48h和72h,對照組、PBS組以及空病毒組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)紊亂,出現(xiàn)肺泡壁斷裂破壞,肺泡間隔明顯水腫、增寬,大量炎性細胞浸潤,肺泡腔內(nèi)出現(xiàn)水腫液及炎性細胞,可見少量紅細胞,但miRNA-21-5p組肺組織病理損傷程度較以上三組輕。(4)肺組織病理評分:組內(nèi)比較:隨著時間的延長,各組大鼠肺病理評分逐漸增高(P<0.05);組間比較:在高氧損傷24h、48h和72h,miRNA-21-5p組肺病理評分均較其他三組低(P<0.05)。(

5、5)大鼠肺組織濕/干(W/D)重比:組內(nèi)比較:隨著時間的延長,各組大鼠肺W/D逐漸增大(P<0.05);組間比較:在高氧24h、48h和72h, miRNA-21-5p組大鼠肺W/D均小于其他三組(P<0.05)。
　　結(jié)論:(1)持續(xù)高濃度氧(大于90％)24h后可以成功建立HALI模型;(2)慢病毒載體可成功轉(zhuǎn)染miRNA-21-5p,并且能在機體內(nèi)長時間表達;(3)miRNA-21-5p對HALI大鼠肺組織具有一定的保護作用