胸部X-線照射對(duì)肺組織Foxp3、TGF-β1表達(dá)的影響及其臨床意義.pdf

1、目的：研究X-線照射對(duì)小鼠肺組織中Foxp3和TGF-β1表達(dá)的影響，分析Foxp3和TGF-β1的表達(dá)水平變化的意義，進(jìn)一步探討X-線照射對(duì)肺組織炎癥和免疫微環(huán)境的影響及其臨床意義。
　　 方法：將 8周齡雌性C57/BL6 小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組小鼠接受12Gy6MV-X線胸部照射，對(duì)照組小鼠不接受照射。在照射后的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)（1、6、12、24、72h 及2、4、8、24w），各組均處死3只小鼠。小鼠處死后右肺組

2、織立刻置于-80℃冰箱保存，左肺組織4％多聚甲醛固定24h后制作石蠟標(biāo)本。用RT-PCR法檢測(cè)Foxp3和TGF-β1基因的表達(dá)情況；采用Western blot 法檢測(cè)Foxp3和RORγt 蛋白的表達(dá)水平；Masson 染色了解肺部纖維化情況，免疫組化技術(shù)檢測(cè)經(jīng)X-線照射后不同時(shí)間點(diǎn)肺組織內(nèi)Foxp3表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)X-線照射后Foxp3 mRNA表達(dá)水平下降，其中以6h、24h、7

3、2h、2w、4w和8w 較為明顯。Foxp3 蛋白表達(dá)水平也有不同程度的下降，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組在照射后6h、24h、72h、8w 時(shí)降低較明顯。免疫組化結(jié)果顯示Foxp3 主要定位于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中，分布于淋巴細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)組Foxp3表達(dá)下降，實(shí)驗(yàn)組免疫組化評(píng)分（3.48±1.05）與對(duì)照組（5.89±1.53）比較，有顯著性差異（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組在照射后6h、24h和4w 時(shí)Foxp3 較對(duì)照組表達(dá)降低，差別有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

4、（P<0.01)，實(shí)驗(yàn)組在照射后1h、12h、24w與對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)相比較，F(xiàn)oxp3表達(dá)降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 2.實(shí)驗(yàn)組肺組織TGF-β1 mRNA水平在照射后6h、12h、2w和4w時(shí)的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)。
　　 3.RORγt在照射組和對(duì)照組均表達(dá)。
　　 4.Masson染色顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠經(jīng)X-線照射后于24w時(shí)可以觀察到肺間隔纖維化。
　　 結(jié)論：<

5、br>　　 1.實(shí)驗(yàn)組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后，肺組織Foxp3在mRNA和蛋白水平表達(dá)下降，表明X-線照射對(duì)Foxp3的表達(dá)具有一定下調(diào)的作用。
　　 2.實(shí)驗(yàn)組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后，肺組織TGF-β1 mRNA水平表達(dá)高于對(duì)照組，Masson 染色結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠胸部經(jīng)X-線照射后于24w 時(shí)可以觀察到肺泡間隔纖維化，進(jìn)一步驗(yàn)證了TGF-β1與放射性肺纖維化的關(guān)系。
　　 3.胸部X-線照射肺組織Foxp3的表達(dá)