丹參對(duì)大鼠長(zhǎng)期心肌梗死的治療作用及其機(jī)制研究.pdf

1、盡管當(dāng)前在藥物和手術(shù)治療冠心病(coronary artery disease，CAD)方面取得長(zhǎng)足進(jìn)步，但它仍將是21世紀(jì)人類(lèi)健康的最大挑戰(zhàn)。缺血性心臟病如心肌梗死以心肌細(xì)胞不可逆丟失為主要特征。多年來(lái)，人們一直認(rèn)為：心肌細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞一樣，是一類(lèi)不能再生的處于分化末端的細(xì)胞，補(bǔ)充和取代心肌梗死后引起壞死和凋亡的心肌細(xì)胞是一種不現(xiàn)實(shí)的想法：然而，近年來(lái)的很多研究均證實(shí)，心肌梗死后有心肌細(xì)胞再生的現(xiàn)象存在。這些新生的細(xì)胞多存在于供血充

2、足的梗死區(qū)邊緣和遠(yuǎn)端。同時(shí)研究也表明受損的心肌中富含各種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子，它們可以促進(jìn)心臟以外的干細(xì)胞向損傷區(qū)域募集，促進(jìn)受損心肌的修復(fù)。 血管新生(angiogenesis)指從已存在的脈管系統(tǒng)上長(zhǎng)出新的血管，一般情況下是對(duì)缺血的生理反應(yīng)。血管生成過(guò)程受促血管生長(zhǎng)因子和抑制因子精密調(diào)控，通常只發(fā)生于胚胎發(fā)育，創(chuàng)傷愈合和女性生殖周期。在動(dòng)物缺血模型的實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)，促血管生長(zhǎng)因子可以通過(guò)血管新生提高缺血區(qū)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的輸送。近年來(lái)

3、的臨床研究也證實(shí)，應(yīng)用促血管生成肽刺激血管新生治療冠心病產(chǎn)生鼓舞人心的臨床效果。然而前期的臨床實(shí)驗(yàn)也報(bào)道，作為促血管生長(zhǎng)因子的重組蛋白或基因雖可以提高新的側(cè)枝血管的形成，但也產(chǎn)生不少缺血綜合征，同時(shí)單一應(yīng)用生長(zhǎng)因子的臨床有效性仍然具有爭(zhēng)議。另外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證實(shí)移植骨髓細(xì)胞(bonemarrow cells)、脂肪間質(zhì)細(xì)胞(adipose stromal cells)和內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialpmgenitor cells，EPC

4、s)可以促進(jìn)缺血組織側(cè)枝血管的形成，其機(jī)制可能是分化成內(nèi)皮細(xì)胞或者旁分泌成血管生長(zhǎng)因子。但是，骨髓抽取和細(xì)胞移植都是侵入性過(guò)程，所以不能經(jīng)常進(jìn)行。 另外，目前的研究結(jié)果表明氧化應(yīng)激(oxidative stress)在推動(dòng)長(zhǎng)期心肌梗死向心衰(heart failure，HF)發(fā)展過(guò)程中具有很關(guān)鍵的作用。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠冠脈結(jié)扎后，非梗死區(qū)的過(guò)度氧化應(yīng)激伴隨著SOD活性進(jìn)行性耗竭，進(jìn)一步加劇心衰的發(fā)展。而抗氧化應(yīng)激的藥物如二甲叉三脲

5、(dimethylthiourea，DTTu)或丙丁酚(probucol)可以改善左室功能失常，同時(shí)也能減少炎性因子的生成以及心肌重構(gòu)。中藥在中國(guó)已經(jīng)使用了幾千年，臨床療效確切。與合成的現(xiàn)代西藥相比，天然藥物具有毒副作用小的特點(diǎn)。丹參是中醫(yī)臨床上治療心腦血管疾病的一種常用藥，中醫(yī)認(rèn)為“一味丹參，功同四物”。丹參因具有改善微循環(huán)，擴(kuò)張冠脈，抑制血栓形成，抑制血小板黏附和凝集的功效，兩被廣泛應(yīng)用于治療心腦血管等缺血性疾病。 盡管當(dāng)前

6、已經(jīng)有很多的臨床證據(jù)表明丹參具有良好的心血管疾病治療作用。而且已經(jīng)有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明丹參提取物對(duì)急性心肌缺血心肌具有很好的保護(hù)作用。然而目前尚無(wú)丹參對(duì)于急性心肌梗死后長(zhǎng)期應(yīng)用的療效及其可能機(jī)制的報(bào)道。綜上所述，本研究目的旨在研究丹參提取物的一個(gè)純化組分(apurified fraction of thesalvia miltiorrhiza extract，PFSME)對(duì)大鼠長(zhǎng)期心肌梗死的治療作用，并對(duì)其抗氧化以及促進(jìn)血管新生和心肌再生等作

7、用機(jī)制做初步探討。實(shí)驗(yàn)一丹參對(duì)大鼠長(zhǎng)期心肌梗死治療作用及抗氧化機(jī)制研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸u(píng)價(jià)丹參提取物的一個(gè)純化組分(PFSME)對(duì)大鼠長(zhǎng)期心肌梗死的治療作用及其抗氧化機(jī)制。實(shí)驗(yàn)方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)建立長(zhǎng)期心肌梗死模型。連續(xù)灌胃給予PFSME 4周后，記錄大鼠血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；測(cè)定血清及心肌組織中SOD和GSH-Px酶活力，血清脂質(zhì)過(guò)氧化二級(jí)產(chǎn)物MDA含量；放免檢測(cè)血漿和心肌組織ET-l水平；Masson三色染色檢測(cè)心肌梗

8、死程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：大鼠心肌梗死后連續(xù)給予PFSME 4周顯示其具有良好的治療效果。血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示其具有顯著改善心功能的作用；Masson三色染色結(jié)果說(shuō)明其顯著降低梗死面積；生化檢測(cè)顯示其具有保持血清和心肌組織中SOD和GSH-Px的抗氧化酶的活力在正常生理水平；并顯著降低MDA和ET-1水平。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸u(píng)價(jià)PFSME對(duì)促進(jìn)急性心肌梗死后心肌再生和血管新生，重建血運(yùn)的作用。 實(shí)驗(yàn)方法：采用結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支

9、(LAD)建立心肌梗死模型。連續(xù)灌胃給予PFSME 8周后，記錄大鼠的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)；通過(guò)Masson三色染色和呱染色進(jìn)行形態(tài)學(xué)指標(biāo)包括心重指數(shù)，梗死面積，梗死長(zhǎng)度，左心室周長(zhǎng)和內(nèi)徑等的測(cè)定；通過(guò)計(jì)算血管密度評(píng)價(jià)PFsME對(duì)血管新生的作用，并用免疫組化檢測(cè)VEGF的表達(dá)；心肌再生則通過(guò)檢測(cè)心肌細(xì)胞表達(dá)ki-67數(shù)量判定。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： PFSME具有良好的促進(jìn)血管新生和心肌再生的作用。血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)顯示治療組心功能得到很大改善。組