葛根素對糖尿病小鼠心肌梗死后的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　臨床發(fā)現(xiàn)與非糖尿病患者相比，糖尿病患者心肌梗死后心功能不全的發(fā)病率和死亡率均明顯增高。越來越多的證據(jù)表明，葛根素?zé)o論對心肌梗死還是糖尿病患者均有一定的保護(hù)作用。本研究的目的是探討葛根素是否能夠改善糖尿病小鼠心肌梗死后心功能及其機(jī)制研究。
　　方法:
　　1.糖尿病造模:C57BL/6J小鼠禁食16小時，予以腹腔注射NA120mg/kg，15分鐘后予以STZ100mg/kg腹腔注射。隔日再予以NA，STZ順序

2、腹腔注射。一周后，鼠尾靜脈取血測血糖，F(xiàn)BG大于等于11.1mM視為糖尿病造模成功。
　　2.心肌梗死造模:糖尿病小鼠禁食禁水4小時，注射戊巴比妥鈉麻醉后固定于手術(shù)臺上，經(jīng)口氣管插管，小動物呼吸機(jī)輔助呼吸，開胸暴露心臟，確定左心耳位置，8-0絲線于左心耳下2-3mm結(jié)扎小鼠冠狀動脈前降支(LAD)。結(jié)扎后肉眼觀察小鼠心肌顏色變白，ECG提示ST段抬高提示造模成功，一周后二維超聲心動圖提示節(jié)段性室壁運(yùn)動障礙確認(rèn)造模成功。
　　

3、3.分組:模型小鼠隨機(jī)分為三組:糖尿病假手術(shù)組(n=10);糖尿病心肌梗死未治療組(n=20);糖尿病心肌梗死葛根素治療組(n=20，葛根素100mg/kg/day，腹腔注射，持續(xù)4周)。術(shù)前，術(shù)后第1、2、4周予以二維超聲心動圖測量各項(xiàng)心功能指標(biāo)，并記錄各組的小鼠存活率。4周后，處死所有存活小鼠，取心臟，冰凍切片后予以免疫熒光染色，觀察GLUT4、CD36的表達(dá)及其分布規(guī)律。Western Blot檢測總GLUT4、膜GLUT4和總C

4、D36、膜CD36蛋白的表達(dá)，以及其上游PPARα、Akt、P-Akt等蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　糖尿病心肌梗死小鼠葛根素治療組的存活率明顯高于糖尿病心肌梗死未治療組小鼠。葛根素能夠明顯改善糖尿病小鼠心肌梗死后的心功能，二維超聲心動圖結(jié)果提示葛根素治療4周后心肌活動度、LVEF、LVFS等心功能指標(biāo)均明顯提高。葛根素能夠提高糖尿病小鼠心肌梗死后GLUT4的表達(dá)，并促進(jìn)GLUT4向胞膜轉(zhuǎn)移;減少糖尿病小鼠心肌梗死后CD36