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文檔簡介
1、 目的:研究和探討1,25-(OH)2D3對于STZ誘導的大鼠離體胰島細胞損傷的影響及其可能的作用機制。 方法:分離Wistar新生鼠胰島細胞,體外培養(yǎng)成功后,分為以下5組:正常對照組:培養(yǎng)液中不加入任何干預(yù)因素。1,25-(OH)2D3組:單純加入終濃度10-6M的1,25-(OH)2D3。STZ組:培養(yǎng)細胞中加入終濃度為2.2mM的STZ,作用30分鐘后洗去STZ再培養(yǎng)36小時。低濃度(10-8M)1,25-(OH)2D3
2、保護組和高濃度1,25-(OH)2D3(10-6M)保護組:分別在培養(yǎng)的胰島細胞中加入10-8M和10-6M兩種不同終濃度的1,25-(OH)2D3,作用30分鐘后再加入STZ共同作用30分鐘,洗去作用物,經(jīng)過36小時的恢復期孵育。各組進行以下各項指標檢測。放射免疫法檢測培養(yǎng)液中胰島素含量、電鏡觀察細胞凋亡形態(tài)、TUNEL法計數(shù)細胞凋亡率、RT-PCR法檢測胰島細胞抗凋亡蛋白A20的mRNA表達。 結(jié)論:STZ可誘導大鼠離體胰島細
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