酶解法提取杜仲籽殼中杜仲膠及桃葉珊瑚苷軟膏的制備.pdf

1、以杜仲翅果為研究對象，以蒽酮比色法測定酶解杜仲籽殼液中的總糖含量作為考察指標(biāo)，進(jìn)行了復(fù)合酶1、復(fù)合酶2及復(fù)合酶3對杜仲籽殼酶解預(yù)處理提取杜仲膠的工藝研究。從杜仲粕中提取出來的生物活性物質(zhì)桃葉珊瑚苷，用酶部分水解為桃葉珊瑚苷苷元，并將桃葉珊瑚苷及其苷元制備成軟膏。本研究的主要內(nèi)容如下：
　　 （1）酶解法處理杜仲籽殼考察指標(biāo)的研究
　　 采用差示光度法（△A法)，以酶解液中的總糖含量來考察復(fù)合酶的酶解率。消除了試樣背景的干

2、擾、與普通分光光度法(即用試劑空白)相比，吸收峰明顯改善，其吸收峰與葡萄糖對照品一致，重現(xiàn)性良好，且溶液中的酶不影響總糖含量的測定。結(jié)果表明該方法可以間接表示杜仲籽殼中杜仲膠的提取情況。
　　 （2）復(fù)合酶酶解法提取杜仲膠的工藝優(yōu)化
　　 采用蒽酮比色法測定酶解液中的總糖含量為考察指標(biāo)，研究了復(fù)合酶1處理杜仲籽殼的工藝，得較優(yōu)工藝條件：水浴溫度50 ℃，pH值3.8，酶用量 3％，料液比1∶15（g∶ mL），酶解2次，

3、每次3 h；在此條件下，杜仲膠一次提取率達(dá)到57.65％，是非酶解法的1.3倍。復(fù)合酶2的較優(yōu)工藝：水浴溫度50 ℃、pH值 4.2、酶用量 2.1％、料液比為1∶15的，酶解2次，每次3 h；在此條件下，杜仲膠一次提取率達(dá)到52.17％，是非酶解法的1.2倍。復(fù)合酶3的較優(yōu)工藝：水浴溫度50 ℃、pH值 5.4、酶用量 1.5％、料液比為1∶15，酶解2次，每次3 h；在此條件下，杜仲膠一次提取率達(dá)到49.65％，是非酶解法的1.1倍

4、。
　　 （3）桃葉珊瑚苷的提取純化及軟膏制備
　　 在較優(yōu)上樣量20 mg·g-1及最適宜的洗脫液甲醇–氯仿–石油醚–乙酸乙酯(4∶3∶2∶8)條件下，桃葉珊瑚苷通過硅膠柱分離和重結(jié)晶純化，得純度為95.6％的產(chǎn)品。在溶液pH值5.1，酶解溫度為37℃、酶解時間30 min，用β-葡萄糖苷酶處理30 mg桃葉珊瑚苷，使之部分水解，得到桃葉珊瑚苷及其苷元的混合物。采用如下處方：石蠟4 g，蜂醋1.5g，苯甲酸0.01 g