微生物發(fā)酵在杜仲葉膠提取中作用的研究.pdf

1、本研究針對杜仲膠提取中發(fā)酵這一重要環(huán)節(jié)，以杜仲葉為試驗材料，從單一(復合)菌種的篩選、適宜菌種的最佳發(fā)酵時間、確定篩選適宜降解杜仲葉菌種的衡量指標及發(fā)酵環(huán)節(jié)對杜仲葉膠提取的影響等方面進行了試驗研究。旨在探索杜仲葉膠提取工藝中最適發(fā)酵菌種及最佳發(fā)酵時間。為進一步研究和提高目前杜仲葉膠生產(chǎn)中所采用的自然發(fā)酵效果提供實驗依據(jù)，并為杜仲葉膠提取工藝優(yōu)化提供理論指導。其主要研究結(jié)果如下： 1.在杜仲葉膠提取工藝前期，使用纖維素酶酶解處理杜

2、仲葉，可促進葉片組織降解，使杜仲葉粗膠產(chǎn)率及膠純度均有顯著提高，從而使精膠含量提高5.05％。由此可知，在提膠工藝中，纖維素酶對杜仲葉進行前期酶解處理作用是顯著的。故可進一步選擇適宜降解杜仲葉的菌類。 2.在篩選適宜降解杜仲葉單一菌種的試驗中，供試的黑曲霉、黑曲霉BN、康氏木霉、綠色木霉、綠色木霉1、葡萄白腐菌、纖維素酶、平菇菌8種菌(酶)處理杜仲葉，可極顯著減少葉干重。不同菌(酶)處理對杜仲葉研磨過篩前后干重減少率達到極顯著(

3、P＜0.01)。黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉處理效果極顯著優(yōu)于纖維素酶處理，其中黑曲霉BN處理可使過篩前后干重減少率達到50.095％。因此可見，適宜菌種發(fā)酵處理和研磨過篩兩個步驟在提膠工藝中作用是顯著的，是提膠前期的重要環(huán)節(jié)。 經(jīng)過供試的8種菌(酶)處理杜仲葉，可極顯著降低葉片粗纖維含量。從而有效地分解破壞了含膠細胞壁，并且一定程度上也破壞了含膠細胞外圍的韌皮部、維管束系統(tǒng)及薄壁組織。這樣有利于杜仲膠的提取。各菌(酶)對粗

4、纖維降解能力高低依次為：黑曲霉BN、平菇菌、葡萄白腐菌、綠色木霉、黑曲霉、纖維素酶、綠色木霉1、康氏木霉。其中前四種菌處理效果極顯著優(yōu)于纖維素酶處理，粗纖維降解率均達50％以上。 平菇菌發(fā)酵處理后杜仲精膠含量極低，僅為0.026％，故不宜作為杜仲膠提取發(fā)酵工藝的菌種；其余7種菌(酶)處理精膠含量均高于未經(jīng)發(fā)酵對照處理，其中黑曲霉BN處理可使杜仲精膠含量提高17.756％。黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉、黑曲霉4種菌處理優(yōu)于纖維

5、素酶處理。 黑曲霉BN、葡萄白腐菌、綠色木霉可作為適宜降解杜仲葉的單一菌種。 3.降解杜仲葉復合菌種篩選試驗，得出黑曲霉BN+葡萄白腐菌發(fā)酵杜仲葉可使發(fā)酵后干重與研磨過篩后干重比未經(jīng)發(fā)酵處理對照減少19.023％和52.724％；使過篩前后干重減少率達到44.867％；對杜仲葉粗纖維降解高達67.763％；粗膠產(chǎn)率和精膠含量比未經(jīng)發(fā)酵處理提高21.429％和26.017％。因此確定杜仲葉膠提取發(fā)酵工藝的適宜復合菌種為黑曲

6、霉BN+葡萄白腐菌。 4.對發(fā)酵后干重、過篩后干重、研磨過篩前后干重減少率、發(fā)酵液總糖含量、杜仲葉粗纖維降解率、所得粗膠產(chǎn)率、粗膠純度、粗膠中精膠含量等指標綜合分析得出：研磨過篩前后干重減少率、杜仲葉粗纖維降解率和所提取粗膠中精膠含量三項指標可作為杜仲膠提取工藝發(fā)酵環(huán)節(jié)中菌種篩選的評價指標。 5.降解杜仲葉適宜復合菌種(黑曲霉BN+葡萄白腐菌)的發(fā)酵時間確定試驗中，過篩前后干重減少率、葉片粗纖維降解率與精膠含量三項指標在