杜仲葉中活性成分的積累規(guī)律及其提取物的制備.pdf

1、杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)為我國特有的杜仲科杜仲屬植物，是一種名貴的滋補中藥材，傳統(tǒng)以杜仲樹皮入藥?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉也具有很高的藥用價值，杜仲葉和樹皮現(xiàn)均收載于《中國藥典》（2010年版一部），具有補肝腎、強筋骨和降血壓等功效。
　　藥材活性成分含量是衡量中藥材質(zhì)量優(yōu)劣的重要指標，不同時期杜仲葉中有效成分的含量會出現(xiàn)變化，而生長季節(jié)，采收時間，氣候條件等因素都會對活性成分含量產(chǎn)生不同程度的影響，了解杜

2、仲葉不同發(fā)育階段活性成分含量的變化規(guī)律并適時采收才是保障和提高中藥材產(chǎn)量和質(zhì)量的關鍵。
　　杜仲葉提取物是由杜仲葉經(jīng)提取精制等步驟制備而成，由于杜仲品種、產(chǎn)地、光照、土壤、田間管理、采收加工、炮制等因素，對杜仲質(zhì)量均有影響。為了獲得優(yōu)質(zhì)杜仲葉藥材，本文以杜仲葉4種活性成分為指標研究了杜仲葉中主要活性成分的積累規(guī)律，尋找最佳采收期，對杜仲葉提取物的制備工藝和質(zhì)量控制方法進行了研究。通過3批中試試驗制備了杜仲葉提取物。
　　本文

3、研究結(jié)果如下：
　　一、建立了HPLC法測定杜仲葉中活性成分的含量測定方法，采用變換波長和梯度洗脫HPLC法測定。最佳色譜條件是：色譜柱：Thermo Hypersil Gold C18(250mm×4.6mm×5μm)；以甲醇為流動相A，以0.5％磷酸水溶液為流動相B進行梯度洗脫；流速：1.0mL/min；(0～30 min，A：5%→10%，B：95%→90%；30～70 min，A：10%→25%，B：90%→75%)；檢測

4、波長為206 nm（0～15 min），236 nm（15～55 min）；體積流量1.0 mL/min。結(jié)果顯示：不同采摘期的杜仲葉中桃葉珊瑚苷、綠原酸、車葉草苷、京尼平苷酸的含量差異很大，若以綠原酸為采收指標，則杜仲葉的最佳采收期為5月底至6月初；若以環(huán)烯醚萜類（桃葉珊瑚苷、京尼平苷酸、車葉草苷）為采收指標，則杜仲葉最佳采收期為5月底至6月上旬；綜合考慮杜仲葉干物質(zhì)產(chǎn)量和活性成分含量，杜仲葉最佳采收期也是5月底至6月上旬。
　

5、　二、杜仲葉提取物制備條件的優(yōu)選：用閃式提取器提取杜仲葉，噴霧干燥法制得杜仲葉提取物，用高效液相色譜法測定杜仲葉中活性成分的含量。結(jié)果顯示提取物中桃葉珊瑚苷、綠原酸、車葉草苷、京尼平苷酸的平均含量高于杜仲葉的4倍左右。
　　三、杜仲葉中活性成分的簡單純化：采用HPD100大孔吸附樹脂吸附，用蒸餾水和50%乙醇以2.0mL/min的流速進行洗脫，收集水洗脫液和乙醇洗脫液，測定桃葉珊瑚苷、綠原酸、車葉草苷、京尼平苷酸的含量。結(jié)果顯示杜