細支氣管肺泡癌的分子生物學研究.pdf

1、研究背景： 細支氣管肺泡癌(BAC)是肺腺癌中的一個亞型，具有單純細支氣管肺泡生長模式，而沒有基質、血管或胸膜侵犯的證據(jù)。掘報道，腺癌伴BAC特征和BAC局灶浸潤性腺癌與單純BAC的預后的相類似，均明顯好于其他腺癌患者。近年來一些發(fā)達國家的研究資料提示，BAC的發(fā)生率呈明顯上升趨勢。靶向治療是近年腫瘤學界韻研究熱點之一，大型研究顯示，對EGFR-TKI敏感的患者傾向于為腺癌或BAC，這使得對該NSCLC亞型，特別是其與EGFR之

2、間關系的研究興趣有了相當程度的提高。人乳頭瘤病毒(HPV)是一類嗜上皮的DNA致瘤病毒。隨著分子生物學技術的發(fā)展，不斷有從肺癌組織中檢出HPV DNA相關序列的文獻報道。但HPV感染與肺癌發(fā)生的關系，目前說法不一。 目的： 探索BAC分子生物學特點，包括EGFR-TK結構域的突變、EGFR和HER2的基因拷貝數(shù)和蛋白表達，探討它們與BAC的發(fā)生發(fā)展、治療反應以及預后的關系，并探討HPV感染在BAC發(fā)生中的作用。

3、方法： 采用PCR和DNA測序法檢測中國人BAC石蠟包埋藏組織標本EGFR基因突變情況，PCR和EGFR突變檢測試劑盒檢測BAC患者外周血EGFR基因突變情況，熒光原位雜交法(FISH)檢測組織標本中癌細胞的EGFR和HER2基因拷貝數(shù)，免疫組織化學法(IHC)檢測EGFR和HER2的蛋白表達，PCR和DNA原位雜交法(ISH)檢測HPV DNA，實驗數(shù)據(jù)應用SPSS14.0軟件進行統(tǒng)計學分析。 結果： BAC組

4、織標本中EGFR基因突變率50％(16/32)，其中7例(占43.8％)為外顯子19上的缺失突變，1例(6.2％)為D807N，8(50％)為L858R；EGFR基因突變與性別(p=0.476)、吸煙情況(p=0.414)、病理亞型(p=0.151)和EGFR蛋白表達(p=0.231)沒有顯著相關性，與EGFR基因拷貝數(shù)有非常顯著的相關性(p=0.001)。8例外周血EGFR檢測中5例(62.5％)檢測到EGFR基因突變，包括G719X

5、 1例，L858R 1例，插入突變1例，T790M 2例。EGFR基因拷貝數(shù)增加陽性率41.2％(14/34)，與性別(p=0.681)、吸煙情況(p=0.288)和病理亞型(p=0.056)沒有顯著相關性。EGFR蛋白表達陽性率76.5％(26/34)，與性別(p=0.702)、吸炯情況(p=0.724)、病理亞型(p=0.842)和EGFR基因拷貝數(shù)(p=0.252)均沒有顯著相關性。HER2基因拷貝數(shù)增加/基因擴增陽性率5.7％(

6、2/35)，蛋白表達陽性率6.1％(2/34)，均為相同患者，他們的EGFR皋囚拷貝數(shù)增加和表達辦為陽性。PCR擴增檢測BAC的HPV 6/11、16、18型DNA均為陰性，ISH檢測BAC的HPV16/18型DNA僅1例(1/24，4.2％)絀胞核內陽性。 結論： BAC具有較高的對EGFR-TKI敏感性基因突變率、EGFR基因拷貝數(shù)增加的陽性率和蛋白表達陽性率，以及可能的高水平EGFR/HER2共表達，這可能間接解釋