PTEN蛋白在大鼠自體靜脈移植術(shù)后的表達及意義.pdf

1、 目的：本實驗將以Wister大鼠頸靜脈移植到腹主動脈的自體靜脈移植動物模型為基礎(chǔ)研究在靜脈移植術(shù)后的血管中PTEN蛋白的表達情況，作為將PTEN應(yīng)用于臨床治療移植靜脈再狹窄的基礎(chǔ)?！　》椒ǎ簩?50克左右，雌雄各半，3個月齡的Wistar大鼠48只，隨機分成6組，每組8只。在顯微鏡下行無菌顯微外科操作，建立自體頸總靜脈移植到腹主動脈動物模型。各組分別于術(shù)后1、3、7、14、21、28天手術(shù)切取移植靜脈作為實驗組標本，同時取對側(cè)

2、正常靜脈作對照。進行下列檢測：(1)組織學染色：10﹪中性福爾馬林固定的標本石蠟包埋，做4μm厚血管橫斷面連續(xù)切片，行HE及Verhoeff彈力纖維染色。光鏡下觀察組織學形態(tài)，并在計算機圖像分析儀下分析Verhoeff切片，測量血管內(nèi)膜厚度。(2)免疫組化染色：應(yīng)用PTEN多克隆抗體SABC法免疫組化染色，并計算陽性細胞百分比，觀察術(shù)后不同時間PTEN蛋白的表達情況。同法應(yīng)用PCNA單克隆抗體免疫組化染色，計算陽性細胞百分比，表示VSM