阿里紅多糖液體發(fā)酵及提取工藝的研究.pdf

1、本論文首次對(duì)維吾爾傳統(tǒng)中藥材，新疆稀有大型藥用真菌藥用擬層孔菌阿里紅[Fomes officinalis Ames]進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室條件下液體發(fā)酵生產(chǎn)真菌多糖的研究，具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下： （1）利用PDA加富固體平板及斜面培養(yǎng)基，對(duì)采集的阿里紅野生菌株進(jìn)行了分離、純化及保存，并對(duì)培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行了初步考察。結(jié)果表明，阿里紅在15℃～30℃均生長(zhǎng)良好，一般培養(yǎng)至8～10天生長(zhǎng)趨于停止。 （2）采用單因素正交實(shí)驗(yàn)對(duì)搖瓶

2、液體種子培養(yǎng)基的碳源、氮源、金屬離子、生長(zhǎng)因子等的種類及濃度進(jìn)行了選擇與優(yōu)化。結(jié)果表明在種子培養(yǎng)基為葡萄糖3％、蛋白胨1.5％、KH2PO40.3％、MgSO4·7H2O0.1％、VB10.1 mg/mL中培養(yǎng)12天，菌絲體干重達(dá)1.2 mg/mL。 （3）采用單因素正交實(shí)驗(yàn)對(duì)搖瓶液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了選擇，并對(duì)培養(yǎng)基各成分進(jìn)行了優(yōu)化。發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖1％、麥芽浸粉0.3％、蛋白胨0.75％、酵母浸粉0.5％。培養(yǎng)12天，菌絲體

3、干重和胞外粗多糖的產(chǎn)量分別達(dá)1.31 mg/mL和1.55 mg/mL。 （4）在培養(yǎng)基優(yōu)化基礎(chǔ)上，對(duì)發(fā)酵工藝條件進(jìn)行了進(jìn)一步探索研究。采用單因素正交實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基初始pH、裝液量、培養(yǎng)溫度、轉(zhuǎn)速及培養(yǎng)方式等進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，搖瓶最佳培養(yǎng)條件為：初始pH5.0、裝液量75 mL/500mL三角瓶、20℃、180 r/min避光間歇式振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)12天，發(fā)酵液中菌絲體干重和胞外粗多糖可分別達(dá)1.36 mg/mL和1.60 mg

4、/mL。 （5）對(duì)發(fā)酵目標(biāo)產(chǎn)物阿里紅多糖進(jìn)行了熱水浸提、稀酸提法、稀堿提法、超聲波提取法等對(duì)比研究，最終確定超聲波輔助熱水浸提法為最佳提取方法。采用單因素正交試驗(yàn)，以多糖回收率為依據(jù)，對(duì)阿里紅發(fā)酵液菌絲體胞內(nèi)和發(fā)酵液胞外多糖提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，阿里紅菌絲體胞內(nèi)多糖提取的最佳工藝為：超聲波功率90 W、超聲時(shí)間15 min、熱水浸提溫度90℃、干菌絲體與蒸餾水比為1：20、浸提時(shí)間為3h，每克干菌絲體可提取胞內(nèi)多糖66.