蛋白芯片技術(shù)檢測腫瘤標(biāo)志物對乳腺癌的臨床價(jià)值.pdf

1、目的： 1.本課題是通過蛋白芯片(protein chip)技術(shù)檢測乳腺癌(breast cancer)患者、乳腺良性病變患者和正常女性血清中腫瘤標(biāo)志物(tumor markers)表達(dá)的差異，篩選出對乳腺癌有臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，分析其診斷價(jià)值，探討其升高的可能原因；2.通過蛋白芯片技術(shù)檢測乳腺癌患者血清腫瘤標(biāo)志物水平與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況的相關(guān)性，探討腫瘤標(biāo)志物對病情判斷的臨床意義； 3.檢測乳腺癌患者手術(shù)前后、術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移血清

2、腫瘤標(biāo)志物水平的變化并進(jìn)行分析，探討腫瘤標(biāo)志物在乳腺癌病情監(jiān)測，預(yù)后判斷的臨床意義；4.通過蛋白芯片技術(shù)的應(yīng)用，分析蛋白芯片技術(shù)的臨床價(jià)值。 方法：采用多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片診斷系統(tǒng)，檢測分析90例乳腺癌患者，60例乳腺良性病變和100例正常對照者血清12種常見腫瘤標(biāo)志物，包括糖類抗原199(CAl99)、甲胎蛋白(AFP)、神經(jīng)原特異性烯醇化酶(NSE)、游離前列腺特異抗原(f_PSA)、前列腺特異杭原(PSA)、癌胚抗原(CE

3、A)、糖類抗原242(CA242)、糖類抗原125(CAl25)、糖類抗原153(CA153)、鐵蛋白(FER)、人生長激素(HGH)和人絨毛膜促性腺激素(HCG)；首先靜脈采血，靜置離心；試驗(yàn)前將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋；將各待測血清或不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品滴加到不同的芯片分格內(nèi)；將蛋白芯片溫育振蕩，洗滌；芯片小方格內(nèi)各加入反應(yīng)液，溫育振蕩，取出棄去孔內(nèi)液體；剝離蛋白芯片集成塊的上部，放入洗盒中，洗滌4次；加入檢測液，用HD-2001A蛋白芯片儀對蛋白芯

4、片讀取數(shù)據(jù)，獲得結(jié)果。采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；3組樣本率的比較采用χ2分割法；計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)；3組樣本均數(shù)間的多重比較采用SNK-q檢驗(yàn)；應(yīng)用logisitic逐步回歸篩選出有臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物，獲得相應(yīng)的數(shù)學(xué)模型即回歸方程，通過ROC曲線分析CEA，F(xiàn)ER，CA125，CA153及l(fā)ogistic回歸結(jié)果的曲線下面積(AUC)。 結(jié)果：乳腺癌組CEA、CA125、FER、CA15

5、3水平均顯著高于乳腺良性病變組和正常對照組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；乳腺良性病變組CEA、CA125、FER、CA153與正常對照組差異無顯著性意義(P＞0.05)；而CA199、NSE、CA242、HCG、AFP、f-PSA、PSA、HGH在乳腺癌組、乳腺良性病變組和正常對照組間差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；乳腺癌組與正常對照組血清CEA、CA125、FER、CA153的logistic回歸方程P1=1/1+e-(-1.9+2.25×

6、CEA+3.12×CA125+10.59×CA153)；乳腺癌組、正常對照組CEA、CA125、FER、CA153和聯(lián)合CEA、CA125、CA153三種腫瘤標(biāo)志物的logistic回歸曲線轉(zhuǎn)化參數(shù)P1的ROC曲線中，單獨(dú)檢測時(shí)CA153的AUC最大，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，CA125、CA153、CEA、FER聯(lián)合檢測的AUC大于各項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測的AUC，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。 乳腺癌患者腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組

7、CEA、CA125、FER、CA153水平及陽性率高于無轉(zhuǎn)移組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清CEA、CA125、FER與CA153的logistic回歸方程P2=1/1+e (2.27+2.05×CEA+1.94×FER+1.06×CA125+1.84×CA153)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清CEA、CA125、FER、CA153和四種腫瘤標(biāo)志物的logistic回歸曲線轉(zhuǎn)化參數(shù)P2的ROC曲

8、線中，單獨(dú)檢測時(shí)FER的AUC最大，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，四種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測的AUC大于各項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單獨(dú)檢測的AUC，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；乳腺癌患者腫瘤直徑d＞3cm組CEA、CA125、FER、CA153水平均顯著高于腫瘤直徑d＜3cm組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。單因素logistic回歸分析CEA，CA125，F(xiàn)ER，CA153是腫瘤大小的危險(xiǎn)因素。乳腺癌患者術(shù)后組血清CEA、FER、CA125

9、和CA153水平明顯降低，與術(shù)前組比較，差異均有顯著性意義(P＜0.0 1)；手術(shù)后3個(gè)月患者血清CEA、FER、CA125和CA153水平與正常對照組比較，差異無顯著性意義(P＞0.05)；乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組患者血清CEA、FER、CA125、CA153水平與無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組比較、差異均有顯著性意義(P＜0.01)；復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組與無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組血清CEA、CA125與CA153的logistic回歸方程P3=1/1+e -(-21.00+11.

10、50×CEA+20.31×CA125+21.70×CA153)；復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組與無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組CEA、CA125、FER、CA153和聯(lián)合四種腫瘤標(biāo)志物的logistic回歸曲線轉(zhuǎn)化參數(shù)P3的ROC曲線中，單獨(dú)檢測CA153的AUC最大，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)；四種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合的AUC大于腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測的AUC，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。 結(jié)論：應(yīng)用蛋白芯片技術(shù)聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物對乳腺癌的診斷、監(jiān)測其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移均有

11、較高的臨床價(jià)值；血清CA125、CA153、CEA、FER是乳腺癌輔助診斷的理想指標(biāo)，其聯(lián)合檢測有利于提高乳腺癌的診斷率；血清CA125、CA153、CEA、FER為乳腺癌患者腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的高危因素，與腫瘤大小正相關(guān)，其血清水平反映了機(jī)體的腫瘤負(fù)荷；動(dòng)態(tài)監(jiān)測CA125、CA153、CEA、FER對乳腺癌預(yù)后具有重要臨床價(jià)值；聯(lián)合檢測CA125、CA153、CEA、FER對于乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷，手術(shù)前后、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的病情監(jiān)測是比較理想的