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文檔簡介
1、目的:評(píng)價(jià)戴氏綠僵菌(Metarhizium taii)的抗腫瘤效應(yīng),并對(duì)其活性次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離和檢測分析。
方法:采用皮下移植瘤法,建立荷S180、B16實(shí)體瘤小鼠模型,觀察小鼠體重、瘤重、死亡率、抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)及存活時(shí)間延長率等指標(biāo),評(píng)價(jià)M.taii有效部位體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng);利用高效液相色譜(HPLC)法建立M.taii中主要核苷類活性成分的指紋圖譜;采用多種色譜分離法對(duì)M.taii抗腫瘤氯仿萃取部位進(jìn)行
2、分離純化,并應(yīng)用質(zhì)譜、核磁共振等波譜技術(shù)鑒定單體化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。利用磺酰羅丹明蛋白(sulforhodamineB,SRB)染色法測定分離純化物抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性。
結(jié)果:M.taii有效部位,在50mg/kg、100mg/kg劑量時(shí)對(duì)昆明小鼠荷S180實(shí)體瘤的生長有明顯的抑制作用,抑瘤率分別33.57%、57.88%;100mg/kg的M.taii有效部位對(duì)C57BL/6小鼠荷B16黑色素瘤的生長有明顯的抑制作用,抑
3、瘤率為31.49%。M.taii有效部位能明顯影響免疫器官指數(shù),抑制腫瘤組織血管的形成,并抑制惡性黑色素瘤細(xì)胞B16向肺轉(zhuǎn)移。進(jìn)一步的活性次生代謝產(chǎn)物分離與檢測分析結(jié)果提示,M.taii含有尿嘧啶、胞苷、尿苷、2’-脫氧尿苷、肌苷、鳥苷、腺嘌呤、胸苷、腺苷和2’-脫氧腺苷等10種核苷類化合物,其中腺苷、尿嘧啶、尿苷是主要核苷類成分,含量分別為2388±94μg/g、1601±52μg/g、1295±57μg/g。從M.taii中分離鑒定
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