貝加爾唐松草內(nèi)生真菌的分離純化及其次級代謝產(chǎn)物生物活性研究.pdf

1、近年來藥用植物內(nèi)生真菌是得到新的活性天然產(chǎn)物及研發(fā)新藥的潛在資源，具有重要的研究和開發(fā)利用價值。甘肅省藥用植物資源豐富、分布廣泛，但關(guān)于藥用植物內(nèi)生真菌的研究報道較少，因此，本論文以甘肅省貝加爾唐松草作為研究材料，從其各組織分離純化得到內(nèi)生真菌，初步研究內(nèi)生真菌次級代謝產(chǎn)物的抗氧化、抗菌活性，研究內(nèi)容和結(jié)果如下：
　　采用組織分離法，從藥用植物貝加爾唐松草(Thalictrum baicalense Turcz.)的根，莖，葉，種

2、子中共分離得到18株內(nèi)生真菌，根據(jù)形態(tài)進(jìn)行初步鑒定，分屬于曲霉屬、頂孢霉屬、鐮刀菌屬、香柱菌屬、鏈格孢菌屬、匍柄霉屬，其中鐮刀菌屬為優(yōu)勢屬，占33.33%。
　　制備18株內(nèi)生真菌的次級代謝產(chǎn)物，利用加熱回流法對干燥菌絲體進(jìn)行提取，提取液減壓蒸干得菌絲體乙醇提取部位；用乙酸乙酯和正丁醇分別對發(fā)酵液進(jìn)行萃取，各萃取3次，合并每次萃取液，減壓蒸干，得到發(fā)酵液乙酸乙酯和正丁醇萃取部位。
　　采用DPPH自由基清除法、總還原力法、羥

3、基自由基清除法和微量肉湯稀釋法對貝加爾唐松草內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行抗氧化及體外抑菌活性研究。抗氧化結(jié)果表明，菌株發(fā)酵液的乙酸乙酯部位普遍具有抗氧化活性，其中菌株Y-3對DPPH自由基清除活性最強，達(dá)到91.04%，其活性僅次于Vc，菌株J-2對羥基自由基清除活性最大，達(dá)到77.86%，菌株Z-6總還原力較好，Vc的相當(dāng)含量為190.2μg/mg。抑菌活性結(jié)果表明，菌株Z-1乙酸乙酯部位抑菌活性最好，對金黃色葡萄球菌和地衣芽孢桿菌的MIC值

4、為125μg/mL，對肺炎克雷伯菌、大腸桿菌、無乳鏈球菌、銅綠假單胞菌的MIC值均為250μg/mL；菌株Z-3和Z-4正丁醇部位抑菌活性較好，對6種供試菌的MIC值都達(dá)到250μg/mL；菌株Z-7乙醇部位抑菌活性較好，對金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸桿菌和銅綠假單胞菌的MIC值均為500μg/mL，對無乳鏈球菌和地衣芽孢桿菌MIC值為1000μg/mL。
　　利用硅膠和Sephadex LH-20凝膠柱層析，并結(jié)合薄層色譜