細(xì)菌性木聚糖酶高產(chǎn)菌株的篩選及其酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、木聚糖酶是可分解世界上第二豐富的可再生有機(jī)碳源——半纖維素的主要酶制劑，在食品、造紙、飼料及能源轉(zhuǎn)化等方面都有廣闊的應(yīng)用前景。本課題從木聚糖酶高產(chǎn)菌的篩選、鑒定、酶學(xué)性質(zhì)研究到產(chǎn)酶培養(yǎng)條件的優(yōu)化做了系統(tǒng)的研究，在國內(nèi)首次篩選和鑒定了一株高產(chǎn)木聚糖酶的類芽孢桿菌，主要結(jié)果如下：
　　本研究采用自制玉米芯木聚糖及樺木木聚糖純品為唯一碳源進(jìn)行初篩培養(yǎng)和復(fù)篩培養(yǎng)，以透明圈直徑和透明度為指標(biāo)，從來自不同的富含半纖維素的土壤樣品中分離純化得到

2、30株木聚糖酶產(chǎn)生菌株;再通過搖瓶發(fā)酵及DNS法檢測酶活，得到三株木聚糖酶的高產(chǎn)菌株:L0302、L0602、L0604，其木聚糖酶活力分別達(dá)到:110.79U、118.22U、117.94U。經(jīng)形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特征、生理生化特性及菌種16SrRNA的鑒定，初步確定三株菌均為類芽抱桿菌屬，并最終選定L0604為出發(fā)菌株做進(jìn)一步的研究。
　　基于對(duì)木聚糖酶研究的需要，探討了木聚糖酶粗酶液的基本性質(zhì):粗酶液的最適反應(yīng)pH為5.0、最適反應(yīng)

3、溫度為50℃;酶液在pH5.0時(shí)穩(wěn)定性最好，在pH4.0～10.0范圍內(nèi)相對(duì)酶活均保持在80％以上，說明該菌株所產(chǎn)木聚糖酶能在較大pH范圍內(nèi)保持穩(wěn)定;酶液在40℃時(shí)穩(wěn)定性最好，隨保溫時(shí)間的延長，酶活可得到相應(yīng)的提升，在20℃～50℃之間均有較好的穩(wěn)定性，酶活可保持在最適溫度時(shí)的88％以上;Cu2+、Zn2+、Mg2+對(duì)酶活有較好的激活作用，且在一定范圍內(nèi)，濃度越大，作用越強(qiáng)，其中Cu2+的激活作用最強(qiáng)，使該酶酶活可提高到150％。