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1、目的:建立酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)定量檢測(cè)人血清巨噬細(xì)胞抑制因子-1(MIC-1)濃度的方法體系,并評(píng)估其準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、重復(fù)性。 方法:通過(guò)免疫反應(yīng)將MIC-1標(biāo)準(zhǔn)品和人血清樣本進(jìn)行衍生化,生成可見(jiàn)光區(qū)可檢測(cè)的免疫復(fù)合物。在450nm波長(zhǎng)處運(yùn)用可見(jiàn)光分光光度法測(cè)定該復(fù)合物的吸光度。以MIC-1標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為橫坐標(biāo),以吸光度值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)血清樣本的吸光度即可推算血清中的MIC-1濃度。用該方法對(duì)8份正常
2、人和8份2型糖尿病患者的血清樣本進(jìn)行定量檢測(cè),通過(guò)批內(nèi)差異系數(shù)、批間差異系數(shù),加標(biāo)回收率,線性范圍等指標(biāo)對(duì)該方法進(jìn)行評(píng)估。 結(jié)果:在線性范圍7.813pg/mL~500pg/mL內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)曲線相對(duì)系數(shù)均在0.990~0.999,批內(nèi)差異系數(shù)1.89%~5.10%,批間差異系數(shù)5.93%~14.07%,加標(biāo)回收率98.0%~101.6%。 結(jié)論:該ELISA雙抗體夾心法準(zhǔn)確、穩(wěn)定,重復(fù)性較好,可檢測(cè)的線性范圍較大,可用于人血
3、清MIC-1濃度的定量檢測(cè)。 目的:研究2型糖尿病患者血清MIC-1的水平特征,初步探討MIC-1與2型糖尿病的相關(guān)性。 方法:課題納入51名正常人和49名2型糖尿病患者,測(cè)定身高、體重、腰圍、血壓、空腹血漿血糖、空腹血清胰島素、血脂、糖化血紅蛋白等。使用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)血清MIC-1濃度。 結(jié)果:2型糖尿病組血清MIC-1濃度[中位數(shù)588.05 pg/mL,全距(158.90~2050.60)pg/
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